一、产品简介
Cat NO.: CP-M062
1. 产品名称:小鼠肾小管上皮细胞
2. 组织来源:肾组织
3. 产品规格:5×105cells/T25细胞培养瓶
4. 细胞简介:
小鼠肾小管上皮细胞分离自肾组织;肾脏是机体的重要器官,它的基本功能 是生成尿液,借以清除体内代谢产物及某些废物、毒物,同时经重吸收功能保留 水份及其他有用物质,如葡萄糖、蛋白质、氨基酸、钠离子、钾离子、碳酸氢钠 等,以调节水、电解质平衡及维护酸碱平衡。肾脏同时还有内分泌功能,生成肾 素、促红细胞生成素、活性维生素D3、前列腺素、激肽等,又为机体部分内分泌 激素的降解场所和肾外激素的靶器官。肾脏的这些功能,保证了机体内环境的稳 定,使新陈代谢得以正常进行。肾小管是机体肾脏器官上与肾小囊壁层相连的一 条细长上皮性小管,具有重吸收(reabsorption)和排泌作用。肾小管按不同的形 态结构、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和远端小管三部分;近端小管可分 为直部和曲部,曲部也称为近曲小管,位于皮质迷路内,于肾小体附近高度蟠 曲;远端小管曲部也称为远曲小管,位于皮质迷路内。肾小管上皮细胞是肾小管 外面的一层细胞,肾小管上皮细胞的分离、培养是研究肾脏疾病的一项重要技 术,目前该细胞分离方法有酶分离法、化学分离法筛网分离法、显微解剖分离 法、流式细胞仪分离法等。肾小管上皮细胞主要功能:①肾小管上皮细胞重吸收 原尿中几乎全部的葡萄糖和氨基酸;②排泌非营养物质进入终尿;③细胞能分泌 炎症介质如细胞因子和趋化因子,通过产生IL-8或直接趋化白细胞参与急性炎症反 应;④移植肾炎症和新月体肾炎中PTEpiC表达IL-2R和MHC-Ⅱ类抗原,这说明肾 小管上皮细胞参与肾免疫损伤的发生。随着对肾间质纤维化机制研究的日渐加 深,肾小管上皮细胞(RTECs)在其中的作用日益被人们重视。因此,提供良好 的肾小管上皮细胞模型,在肾小管间质疾病的发病机制和治疗药物筛选的研究中 是非常重要的。
本公司生产的小鼠肾小管上皮细胞采用先机械研磨过不锈钢网筛分离得到肾 小管、后用胶原酶消化,结合上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量 约为5×105cells/瓶;细胞经Cytokeratin-18/PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以 上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5. 培养基信息:
M199、FBS、上皮细胞生长添加剂、Hydrocortisone、Insulin、Transferrin、 Epinephrine、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用小鼠肾小管上皮细胞专用完全培养基(产品货号:CM-M062)
作为体外培养小鼠肾小管上皮细胞的培养基。
二、细胞培养状态 发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在技术部标准操作流程下,小鼠肾小管上皮细胞可传2-3代;建议您收到细 胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱 和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培 养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待 细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全 培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和 技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时 和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问 题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考