在使用传统高保真酶进行PCR时,难免会遇到一些棘手的问题。例如保真度不够,扩增得到的片段测序后发现仍有目的碱基发生突变或缺失。扩增的时间也相对漫长,有时扩增5kb的片段也要花费将近2个小时的时间。现小翌推出一款快速高保真PCR以解决您的烦恼!
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye) 预混液中含有预先添加的电泳指示剂,PCR产物可直接进行电泳,扩增产物为平末端。该产品具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系中只需加入引物和模板即可。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品名称
2× Hieff Canace® AdvanceFast PCR Master Mix (With Dye)
产品特点
- 超高保真:低错配率,高GC易突变序列中碱基错配比231/300000;
- 扩增速度快:延伸速度快至5 sec/kb;
- 适用性广:可覆盖20-80%GC含量的基因,耐受小鼠裂解物和20%的血液;
- 稳定性好:37℃下存放7d,不影响产品性能;
- 快速简便:只需加入引物和模板即可进行扩增,带有上样染料,可直接电泳;
产品性能展示
01
保真度高,错配率低
以不同物种基因组为模板,选取6段GC rich、极易发生碱基突变/丢失的片段进行扩增,将各自PCR产物克隆至载体,并对每种序列挑取100个单克隆进行测序以确认碱基序列错配/突变情况。结果显示10164ES发生碱基错配/突变的比例优于国内外品牌试剂。
02
10kb以内片段扩增延伸时间可达5 sec/kb
使用10164ES和T产品均以5 sec/kb的延伸速度从100 ng人基因组模板扩增不同长度片段(0.4-10 kb),延伸时间均要求为5 sec/kb。结果显示,10164ES在10kb以内的片段均可以5 sec/kb的延伸速度扩增。Marker: Yeasen 10510ES。
03
可扩增不同GC含量的基因片段
使用10164ES从人gDNA模板中扩增23-76% GC含量片段,延伸时间设置5 sec/kb。结果显示,产品扩增特异性良好,能兼容不同GC含量片段扩增。Marker: Yeasen 10510ES。
04
可兼容不同类型的模板
使用10164ES从不同样本中扩增不同长度片段,延伸时间设置5-10 sec/kb。结果显示本产品扩增特异性良好,能兼容不同模板的不同片段扩增。
注:1.小鼠gDNA 1 kb;2.小鼠gDNA 2 kb;3.小鼠gDNA 6 kb;4.玉米gDNA 1 kb;5.水稻gDNA 2 kb-A;6.水稻gDNA 2 kb-B;7.人293细胞cDNA 1 kb;8.人293细胞cDNA 2 kb ;9.人293细胞cDNA 3 kb;10.人293细胞cDNA 12 kb;11.大肠杆菌菌液8 kb;12.大肠杆菌菌液16 kb;13.水稻gDNA 10 kb-A;14.水稻gDNA 10 kb-B;15.水稻gDNA 10 kb-C;16.水稻gDNA 20 kb-A;17.水稻gDNA 20 kb-B;18.人血液直扩3 kb。Marker: Yeasen 10510ES
05
不同物种模板扩增检出率高
用10164ES分别对拟南芥、油菜、马铃薯0.5-10 kb 不同GC含量的片段进行扩增,延伸时间5 sec/kb,结果显示10164ES可保证扩增。Marker: Yeasen 10510ES。
用10164ES分别对拟南芥、油菜、果蝇、秀丽线虫和斑马鱼中随机序列(序列随机拉取),0.5-10kb覆盖20-80%GC含量的片段进行扩增,延伸时间5 sec/kb,结果显示10164ES检出率高。
06
稳定性好,37℃可放置7天
使用37℃热加速放置3 d和7 d的10164ES分别扩增100 ng人基因组中3 kb和5 kb的DNA片段,延伸时间设置5 sec/kb。结果显示产品具有不错的稳定性。Marker: Yeasen 10510ES。
客户试用反馈
01
动物gDNA-120bp-50%GC
客户评价:PCR过程速度快,条带合适,可在琼脂糖电泳中直接上样。进口N品牌的条带偏上,可能是自身的buffer影响,且未添加loading buffer,该产品可替代目前我的实验方案中的高保真酶。
02
植物cDNA-729bp-45.13%GC
客户评价:与进口T品牌相比,克隆条带更加清晰单一,整个PCR时间也更快,跑胶时不用再额外加染料,非常方便快捷。
03
微生物gDNA-1158、1953bp-58.8%、52.9%GC
客户评价:与国产V品牌相比,效果相当,个人感觉更佳。
04
植物cDNA-2000bp-40%GC
客户评价:效果很好,条带清楚。
产品试用通道
10163ES01-无电泳指示剂
10164ES-含电泳指示剂