来自美国国家卫生研究所和约翰霍普金斯大学等的科学家们在2018年第132期的《Biochemical Engineering Journal》上发表了题为“Continuous production process of retroviral vector for adoptive T- cell therapy”的文章。
文中,为对逆转录病毒载体生产进行规模放大,使生产细胞PG13在配有交替式切向流(ATF)灌流装置的搅拌罐生物反应器内的微载体上生长。微载体是10μm-0.5mm的微球,可用于支持细胞的贴附,并悬浮于生物反应器内,以提供受控的生长条件。这样,即可对生长参数进行监测和连续的控制,如溶氧浓度、pH以及营养物质。该工艺对特异性病毒载体滴度或其在患者T细胞转导中的载体效率无不利影响。
在11天的灌流周期中,病毒载体滴度增加,获得4.8x10^11转导单位(TU),平均滴度4.4x10^7 TU/mL,平均特异性产率10.3(TU)/cell,说明这种方法是大量生产用于临床使用的活性病毒载体的有效途径。
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