冻存管又称菌种保存管、磁珠保存管、磁珠冻存管。微生物实验室常用的菌种保存方法有牛奶法、甘油法、斜面法等。复杂程度各异,效果也差别很大。冻存管一般按容量划分为0.5ml,1.0ml,1.5ml,1.8ml,2.0ml,4ml,5ml,7ml,10ml等。一般的冻存管不能进入液氮里,只有特殊材料处理的才可以放入。同时冻存管还有双层的和无双层的带硅胶垫和没有硅胶垫的等种种,还有无色和杂色及各种纯色等不同。如果需要进入液氮保藏的就要选择密封的耐低温的专用冻存管,还要认清所购买的冻存管是否是无菌以及无DNA,RNA。
冻存管的使用步骤
⑴ 从细菌纯培养物中挑取新鲜培养物配成大约为3-4麦氏比浊度的菌悬液接种与菌种保存管中。
⑵ 拧紧保存管,来回颠倒4-5次使细菌乳化,不能旋摇。
⑶ 把保存管放入冰箱保存(-20℃--70℃)
冻存管安全使用建议
1、使用冻存管储存样本时,严格要求应把冻存管放入液氮的气相层或冰箱中保存!如果冻存管储存于液氮液体中,液氮有一定几率会渗入冻存管内部,复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡,这样极易造成冻存管的炸裂,并具有生物危害性。
2、操作冻存管复苏,全程使用安全防护设备,建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下,请佩戴护目镜或防护面罩。由于夏季室内温度会高于冬季,请格外小心。
3、冻存细胞储存过程中,冻存管的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生,冰塞会抑制两侧的液体温度传递进而产生危险的高压力并导致冻存管受损。
4、冻存的样本量不要超过冻存管要求的最大工作体积。