茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)-软件手册-资讯-生物在线

茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)

作者:上海雅吉生物科技有限公司 2021-06-02T00:00 (访问量:1808)

 茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)



茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等,是一类儿茶素为主体的黄酮化合物,儿茶素占 60~80%, 具有 C6-C3-C6 碳骨架结构,是一种重要的天然抗氧化物质,能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁,是形成茶叶色香味的主要成份之一,也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用,能有效地阻止放射性物质侵入骨髓,并可使锶 90 和钴 60 迅速排出体外。


Leagene 茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)检测原理是以酒石酸铁为底物,利用茶多酚与酒石酸铁反应,生成稳定紫蓝色化合物,以分光光度计 540nm 处测定吸光度,在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比,与标准曲线比较进而计算茶多酚含量,该试剂盒主要用于测定植物组织、血清等样品中茶多酚含量,尤其适用于测定茶叶中茶多酚含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。


产品组成:

编号
名称
TO1203
50T
Storage
试剂(A): 茶多酚标准(1mg/ml) 2ml 4℃ 避 光
试剂(B): TP Assay buffer 75ml 4℃
试剂(C): TP 显色液 25ml 4℃ 避 光
使用说明书 1 份
自备材料:
1、茶叶、绿茶等待测样本
2、蒸馏水
3、研钵、200 目细胞筛
4、离心管或试管
5、水浴锅或电炉
6、离心机
7、比色杯、分光光度计

操作步骤(仅供参考)
1、准备样品:
①植物样品:取 0.2g 植物组织,研磨成粉末,加入煮沸的蒸馏水 10ml,沸水浴浸提
20min,用 200 目细胞筛过滤,滤渣再继续置于新的煮沸的 10ml 蒸馏水,相同操作提取一次,合并两次滤液,5000r/min 离心 15min,取上清液,即为茶多酚提取液。4℃ 避光保存,用于茶多酚的检测。绿茶等液体样本可直接用本试剂盒测定。
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可直接用本试剂盒测定。
③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要可用蒸馏水进行适当匀浆, 5000r/min 离心 15min,取上清液,即为茶多酚提取液,4℃避光保存。
④高浓度样品:如果样品中含有较浓度的茶多酚,可以使用蒸馏水进行适当稀释。
2、配制系列茶多酚标准:用蒸馏水和茶多酚标准(1mg/ml),按下表进行操作,依次稀释。
加入物(μl) 1 2 3 4 5 6
茶多酚标准(1mg/ml) 10 25 50 150 250 400
蒸馏水 490 95 450 350 250 100
相当于茶多酚含量(μg/ml) 20 50 100 300 500 800
3TP 加样:按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的 TP 浓度过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置 2 平行管,求平均值。

加入物(ml) 空白管 标准管 测定管
蒸馏水 0.5 0.25 0.25
系列茶多酚标准(1~6 号) 0.25
待测样品 0.25
TP 显色液 0.5 0.5 0.5
TP Assay buffer 1.5 1.5 1.5
4、TP 测定:以空白调零,比色杯光径 1.0cm,分光光度计测定 540nm 处标准管、测定管的吸光度。

计算:

以系列茶多酚标准浓度(1~6 )(20、50100、300500800μg/ml)为横坐标, 以对应的吸光度为纵坐标,绘制标准曲线,求得回归方程。以测定管吸光度代入回归方程求得提取液中 TP 含量。
组织样本 TP 含量(μg/g)= (C×VT)/(W×VS)
式中:C=根据标准曲线求得提取液中茶多酚含量(μg/ml) VT=提取液的总体积(ml)
W=组织样本的重量(g)
VS=测定时所用提取液的体积(ml)
 

 



茶多酚(Tea Polyphenols,TP)是茶叶中多酚类物质的总称,包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等,是一类儿茶素为主体的黄酮化合物,儿茶素占 60~80%, 具有 C6-C3-C6 碳骨架结构,是一种重要的天然抗氧化物质,能够清除自由基。类物质茶多酚又称茶鞣或茶单宁,是形成茶叶色香味的主要成份之一,也是茶叶中有保健功能的主要成份之一。研究表明茶多酚等活性物质具解毒和抗辐射作用,能有效地阻止放射性物质侵入骨髓,并可使锶 90 和钴 60 迅速排出体外。


Leagene 茶多酚(TP)检测试剂盒(酒石酸铁比色法)检测原理是以酒石酸铁为底物,利用茶多酚与酒石酸铁反应,生成稳定紫蓝色化合物,以分光光度计 540nm 处测定吸光度,在一定范围内吸光度与颜色深浅的变化成正比,与标准曲线比较进而计算茶多酚含量,该试剂盒主要用于测定植物组织、血清等样品中茶多酚含量,尤其适用于测定茶叶中茶多酚含量。该试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。



产品组成:

编号
名称
TO1203
50T
Storage
试剂(A): 茶多酚标准(1mg/ml) 2ml 4℃ 避 光
试剂(B): TP Assay buffer 75ml 4℃
试剂(C): TP 显色液 25ml 4℃ 避 光
使用说明书 1 份
自备材料:
1、茶叶、绿茶等待测样本
2、蒸馏水
3、研钵、200 目细胞筛
4、离心管或试管
5、水浴锅或电炉
6、离心机
7、比色杯、分光光度计

操作步骤(仅供参考)
1、准备样品:
①植物样品:取 0.2g 植物组织,研磨成粉末,加入煮沸的蒸馏水 10ml,沸水浴浸提


20min,用 200 目细胞筛过滤,滤渣再继续置于新的煮沸的 10ml 蒸馏水,相同操作提取一次,合并两次滤液,5000r/min 离心 15min,取上清液,即为茶多酚提取液。4℃ 避光保存,用于茶多酚的检测。绿茶等液体样本可直接用本试剂盒测定。
②血浆、血清和尿液样品:血浆、血清按照常规方法制备后可直接用本试剂盒测定。
③细胞或组织样品:取恰当细胞或组织裂解液,如有必要可用蒸馏水进行适当匀浆, 5000r/min 离心 15min,取上清液,即为茶多酚提取液,4℃避光保存。
④高浓度样品:如果样品中含有较浓度的茶多酚,可以使用蒸馏水进行适当稀释。
2、配制系列茶多酚标准:用蒸馏水和茶多酚标准(1mg/ml),按下表进行操作,依次稀释。
加入物(μl) 1 2 3 4 5 6
茶多酚标准(1mg/ml) 10 25 50 150 250 400
蒸馏水 490 95
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