Western Blot 蛋白质印迹法
WB原理
Western
Blot法采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE(聚丙烯酰胺凝胶电泳)分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如**纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学活性不变。以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原,与对应的抗体起免疫反应,再与酶或同位素标记的第二抗体起反应,经过底物显色或放射自显影以检测电泳分离的特异性目的基因表达的蛋白成分。该技术也广泛应用于检测蛋白水平的表达。
服务流程
1.蛋白样本制备及含量检测;
2.SDS-PAGE凝胶电泳;
3.转膜及抗体结合反应;
4.化学发光成像分析。
最终结果:
1.WB蛋白浓度及电泳上样量;
2.原始图片展示:
3.实验报告(包括:实验步骤;主要仪器及试剂说明;实验结果分析。)
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