抗原纯化的一般方法
抗原物质的纯化方法很多,下面介绍抗原的一般纯化方法。
1. 微生物、类立克次本、类菌质体和病毒等抗原的纯化
首先应分离出纯化的株系或毒株,并对该株系或毒株进行生物化学、血清学、紫外吸收光谱、电镜观察等鉴定,然后将经过签定的纯化株系或毒株进行生物学繁殖,在适当时间再将所需株系和毒株提纯,得到大量材料,最后再予以鉴定,并测定其浓度。
在此要特别注意以下几点:1.材料本身是否稳定,如果不太稳定就要寻找使它稳定的条件;2,材料是否容易从寄主中提纯,利率是否高,要尽量寻找利率高的提纯方法;3,材料本身免疫原性(即抗原性)是否强,经提纯所得材料免疫原性是否损失,要尽量寻找免疫原性强的材料作为抗原,而提纯的方法也以不损害材料的生物活性和抗原性为前提。
所以在进行微生物等抗原纯化的时候,必须熟悉材料的性质、了解材料的繁殖方法和掌握抗原的提纯方法,对工作环境所具备的提纯设备及其功能的要心中有数。总之,不能草率纯化微生物等抗原。
2. 动植物(包括人体)器官组织内的各种蛋白质成分(如激素和酶等)作为抗原物质的纯化
必须解决这些蛋白质或蛋白质复合体与器官和组织内的其他成分的分离,并且要保证所需蛋白质或蛋白质复合体不因为提纯过程的处理而变性,影响免疫原性。因此,熟悉所提纯蛋白质或蛋白质复合体的理化性质,掌握必要的生物化学实验技术,是获得器官组织内蛋白质抗原的前提。对于该抗原物质也要进行纯度鉴定,并且要测定浓度。
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