检测: | 报告基因酶、荧光素酶报告基因检测 |
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适用细胞: | 哺乳动物细胞 |
检测方法: | 生物发光 |
适用于(设备): | 化学发光酶标仪(微孔板) |
产品规格: | 384 孔板、96 孔板 |
标签类型: | 酶标记 |
产品线: | Pierce™ |
底物: | Vargulin(海萤荧光素酶) |
底物属性: | 化学底物 |
底物类型: | 荧光素酶底物 |
目标酶: | 荧光素酶、海萤荧光素酶 |
技术: | 增强的化学发光法 |
数量: | 100 rxn 试剂盒 |
• 海萤辉光测定缓冲液,5 mL,在 4°C 下储存
• Vargulin (1X),5 µL,在 -20°C 下储存
• 2X 细胞裂解缓冲液,6 mL,在室温下储存
接收后,在 -20°C 下储存试剂盒或按上文所述储存单一组分。
海萤荧光素酶辉光检测试剂盒在海萤荧光素酶报告基因存在的情况下提供极其明亮且稳定的生物发光信号(半衰期大于 1 小时)。
海萤荧光素酶辉光检测试剂盒的特点:
•灵敏—对海萤荧光素酶活性进行高度灵敏的检测
• 分泌荧光素酶—在不破坏细胞的前提下支持实时测定和动力学研究
• 稳定—与闪光测定相比,试剂可提供更高的信号稳定性
• 简单—不需要配备进样器的光度计
• 兼容—与其他海萤 或 Vargula 荧光素酶兼容的测定试剂
• 适合自动化—适合用于高通量测定
• 便利—包含一种通用的细胞裂解缓冲液和经过优化的辉光测定试剂
• 安全—允许用户执行非放射性测定
该 Pierce 荧光素酶辉光检测试剂盒包含的试剂用于测定哺乳动物细胞培养基和裂解物中海萤荧光素酶的活性。当与 Thermo Scientific 海萤 Luc 载体一起使用时,该试剂盒提供了一个非常灵敏的生物发光报告基因测定系统,用于对荧光素酶活性进行分泌或细胞内检测。荧光素酶反应产生的光输出可与生成的荧光素酶蛋白的量相关,后者又与驱动荧光素酶表达的启动子的活性成正比。该试剂盒可用于检测使用 Vargulin 作为底物的任何海萤荧光素酶或衍生物的活性。
包括:
细胞裂解缓冲液、反应缓冲液和底物
需要:
海萤荧光素酶和光度计或其他能够监测发光的仪器(如 Thermo Scientific Luminoskan Ascent 和 Varioskan 闪光酶标仪)。
应用:
• 用于分析顺式调节元素和反式作用因子的启动子研究
• 药物筛选
• siRNA 和 miRNA 筛选
• 研究脱靶效应的多通路测定
• 分泌通路白定位报告基因测定
• 信号转导通路分析
• RNA 剪接研究
海萤荧光素酶是来自海洋介形亚纲动物海萤夜光虫的 61kDa 蛋白。海萤荧光素酶在细胞培养基中高度分泌,可对报告基因活性进行活细胞监测。使用光度计捕获的光输出可与生成的海萤荧光素酶蛋白的量相关,并可用于确定驱动海萤表达的启动子的活性。Thermo Scientific 海萤 Luc 载体中的海萤基因针对哺乳动物细胞中的表达进行了修饰,并利用检测试剂盒提供较优性能。海萤辉光试剂可产生辉光型动力学的海萤荧光素酶反应,并推荐用于不配备进样器的光度计或需要批量处理样品的应用。