1 原理及用途
本产品应用竞争抑制胶体金免疫层析的原理制成,用于检测组织(鱼虾蟹、畜禽肉、内脏)、蜂蜜、牛奶样本中的磺胺类药物(Sulfonamides,SAs)。
样本溶液滴入检测卡的加样孔后,样本溶液中的磺胺类药物与金标抗体相结合,从而阻止金标抗体与纤维素膜上磺胺类药物偶联物结合。当样本溶液中的磺胺类药物含量大于检测限时检测线不显色,结果为阳性;当样本溶液中磺胺类药物含量小于检测限时检测线显紫红色,结果为阴性。
2 技术指标
2.1 试剂卡检测下限:以SM2计5ppb(ng/ml)
本试剂卡对磺胺类药物的检测下限如下:
药物名称 |
检测限ppb |
磺胺二甲基嘧啶(SM2) |
5 |
磺胺间甲氧嘧啶(SMM) |
0.8 |
磺胺对甲氧嘧啶(SMD) |
1 |
磺胺邻二甲氧嘧啶(SDM') |
1.5 |
磺胺甲基嘧啶(SM1) |
2 |
磺胺嘧啶(SD或SDZ) |
4 |
磺胺二甲异嘧啶(SM2') |
2.5 |
磺胺间二甲氧嘧啶(SDM) |
3 |
磺胺甲噻二唑(SMT) |
3 |
磺胺氯吡嗪(Esb3) |
7.5 |
磺胺噻唑(ST) |
9 |
磺胺氯哒嗪(SCPA) |
9 |
磺胺甲氧哒嗪(SMP) |
9 |
磺胺二甲氧哒嗪(SDT) |
35 |
磺胺喹噁啉(SQX) |
35 |
磺胺异噁唑(SIZ) |
120 |
磺胺甲噁唑(SMZ) |
120 |
2.2 样本检测下限:以SM2计
组织……………………………5ppb
蜂蜜……………………………20ppb
牛奶……………………………40ppb
3 试剂盒组成
检测卡…………………………50个/盒
样本复溶液……………………30ml
说明书…………………………1份
4 需要的器材和试剂
4.1 仪器:均质器 、氮气吹干装置、振荡器、离心机、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:单道20µl-200µl,100µl-1000µl
4.3 试剂:乙酸乙酯、正己烷
5 样本前处理
5.1 样本处理前须知:
实验器具必须洁净并使用一次性吸头,以避免污染干扰实验结果。
5.2 样本前处理步骤:
5.2.1 组织样本
1)称取4±0.05g去脂肪均质组织样本置50ml离心管中,加入2ml 纯净水,振荡样本成糊状,再加入4ml乙酸乙酯,振荡5min,室温4000r/min以上离心5min;
2)移取2ml上层清澈有机相至洁净玻璃管中,在50-60℃氮气或空气吹干;
3)加入0.5ml样本复溶液溶解干燥的残留物,取下层液体备用。
注:若吹干后剩余的油脂量多,可先加入1-2ml正己烷,振荡混合均匀;再加入0.5ml样本复溶液,混合均匀后静置5分钟左右,液体明显分层。取下层液体备用。
样本稀释倍数:0.25 检测下限:5ppb(SM2)
5.2.2 蜂蜜样本
1)称取1±0.05g蜂蜜样本于15ml离心管中,加入1ml 0.5M盐酸置于37℃环境中30min;
2)加入2.5ml 0.2M 氢氧化钠 (将PH值调至5左右)再加入4ml乙酸乙脂,振荡5min,4000r/min以上室温离心10min;
3)取2ml上层液体清澈有机相至洁净玻璃管中,在50-60℃下氮气或空气吹干;
4)加0.5ml样本复溶液溶解干燥的残留物,备用。
样本稀释倍数:1 检测下限:20ppb(SM2)
5.2.3牛奶样本
1)取新鲜牛奶样本用去离子水按1:1稀释后,混匀备用。
样本稀释倍数:2 检测下限:40ppb(SM2)
6 实验步骤
6.1 撕开检测卡铝箔包装袋,取出检测卡,放于平整、洁净的台面上。
6.2 用配套吸管吸取已准备好的样本液体,缓慢、逐滴的(应避免泡沫产生)滴加2-3滴(约60ul)到加样孔(S)内。
6.3 室温下放置8-10分钟判断结果。超过10分钟的结果只能作为参考。
7 结果判断
阴性 阳性 无效 无效
阴性:在检测窗内,检测线(T)及对照线(C)同时出现紫红色线。
阳性:在检测窗内,只有对照线(C)出现一条紫红色线。
失效:在检测窗内,对照线(C)不出现紫红色线。
8 注意事项
8.1 过期或铝箔袋破损的产品,均不可使用。
8.2 检测卡从冰箱中取出时应恢复到室温后打开,打开的检测卡应尽快使用以免受潮后失效。
8.3 不要触摸检测卡中央的白色膜面。
8.4取液滴管不可混用,以免交叉污染。
8.5待检样品溶液需清亮、无混浊颗粒、无细菌污染,否则容易导致阻塞、显色不明显等异常现象,从而影响实验结果的判定。
9 贮藏及保存期
储藏条件:试剂盒于2-30℃干燥环境下保存。
保 质 期:该产品有效期为1年,生产日期见包装盒。