——即平板等电聚焦技术服务

蛋白质药物等电点测试原理：两性电解质在电泳场中形成pH梯度，由于蛋白质为两性化合物，其所带的电荷与介质pH指有关，带点蛋白质在电泳中向极性相反的方向迁移，当到达其等电点时，电流达到最小，蛋白质不再移动，此处的pH值为该蛋白质样品的等电点，与标准品对比后可以进行定量计算，获取蛋白质样品的等电点参数。

“平板等电聚焦测定蛋白质的等电点，是中国药典中规定的方法”

技术指标

■  样品要求：

测试样品中尽可能无盐或低盐；样品纯度在90%以上

■  仪器设备：

MultiphorⅡ Electrophoresis System (GE Healthcare)：内置陶瓷冷却板（260×200 mm）与循环水直接相连，电泳胶直接置于冷却板上，温控效果好。

EPS 3501 XL Power Supply（GE Healthcare）：输出电压（0-3500V）；输出电流（0-400mA）；输出功率（0-200W）；恒压、恒流、恒功率之间可以自动切换。

案例分析

样品名称：重组XXXXXXXX蛋白

样品批号：XXXXXXXXXXXXXX

平板等电聚焦电泳试验参数：上样量10μg

冷凝温度：9℃

电泳程序：预电泳700V 20min；500V 20min；200V 90min。

结果图片：

Q&A

1)       蛋白质的平板等电聚焦和毛细管等电聚焦方法比较。

平板等电聚焦具有分辨率高、重复性好、样品用量大、操作简便迅速等优点。而毛细管等电聚焦相对于平板等电聚焦来说具有耗时短、样品用量少、易于自动化等诸多优点，但相对设备较为昂贵，单次测试费用较高。

2)       平板等电聚焦在蛋白质类药物理化性质分析中的地位。

等电点时蛋白质最基本和重要的理化参数，而平板等电聚焦是测试蛋白质等电点的主要技术手段。由于平板等电聚焦的分辨率高、重复性好、操作简便迅速，在生物化学、分类学、分子生物学及临床医学研究等诸方面，都得到广泛应用。