神经元顺向跨多标记
产品名称： 神经元顺向跨多标记
英文名称： 神经元顺向跨多标记
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武汉枢密脑科学技术有限公司
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神经元顺向跨多标记
简介
大脑神经网络是由数目庞大，以及形态、功能各异的神经元，通过突触连接构成的复杂结构，是大脑行使认知、情感、记忆及想象等活动的结构基础。提示大脑神经网络的结构是理解大脑处理信息的机制的前提，传统的示踪方法促进了人们对大脑神经网络结构的认识，但难以用于研究多个脑区、多种类型神经元通过突触连接形成复杂的神经网络，这类神经网络才是大脑处理特定信息所依赖的环路。
解析大脑不同脑区、不同类型神经元之间的神经环路连接是神经科学研究的重要任务之一，绘制大脑连接体图对于理解大脑如何工作是至关重要的，病毒工具是目前最为有效、应用最广的神经环路示踪工具。神经回路是神经功能的基本单位，是连接大尺度（结构/功能）和小尺度（分子/信号通路）的桥梁，有效地绘制神经回路需要逆行和顺行示踪病毒同时传输多级或单级突触。目前，顺向跨多级的病毒载体工具有HSV和VSV。
图1. 神经元顺向跨多级标记示意图
病毒策略
- HSV-1-129
将rH129-EGFP注射到小鼠腹侧被盖区（VTA），观察到rH129-EGFP顺行跨多级到海马（Hippocampus）、中缝背核（DR）、杏仁核背内侧核前段（BMA）、脚内核（EP）、下丘脑（Hypothalamus）和鼻外皮层（Ect）。
图2. 利用rH129-EGFP标记小鼠腹侧被盖区（VTA）的输出神经环路（BrainVTA）
案列展示
实例一：R-NG的顺向跨多级病毒示踪
实验动物：VGlut2-ires-Cre (Slc17a6tm2(cre)Lowl/J) mice
使用的病毒：H129DTK-TT
实验方法和结果：将H129DTK-TT注射到VGlut2-ires-Cre鼠的右侧结神经节（R-NG），追踪到病毒顺向跨多级到AP、DMV、AP、PVH、PBNdl、SNc及VTA。
图3. 迷走神经中枢通路的标记（Han W, et al., Cell, 2018）
- VSV
如将VSV-EGFP注射到C57小鼠Spleen区域，在大脑中枢ARC、DMH、PIRI区域检测到荧光信号，表明VSV-EGFP顺行跨多级到了这三个核团。
图4. 将VSV-EGFP注射到小鼠Spleen区域的输出神经环路（BrainVTA）
案列展示
实例一：OB的顺向跨多级病毒示踪
实验动物：C57BL/6 mice
使用的病毒：VSV-mCherry
实验方法和结果：VSV-mCherry注射到小鼠嗅球（OB）后，追踪结果显示，VSV感染72小时后，嗅相关脑区PIRI、LEnt和LC观察到信号；VSV感染96小时后，更多的脑区如AON、PIRI、LEnt、HMSc、LDT及LC都观察到信号。
图5. 嗅球(OB)对基底前脑（BF）的输入网络（Zheng Y, et al., Front Neural Circuitsl, 2018）
可用于研究的神经科学问题：
- 研究大脑特定区域的全脑范围多级输入网络结构；
从高级脑区向特定低级脑区反馈信息输入的网络结构
- 大脑内不同功能亚区之间结构连接的检测及验证；
- 追踪外周器官与中枢神经系统间的联系通路；
- 神经发育过程中的神经网络变化；
- 疾病模型的神经网络变异。
产品列表
| 产品编号 | 产品名称 | 携带荧光蛋白 | 功能 |
| H01001 | rH129-EGFP | EGFP | 顺行跨多级，绿色标记 |
| H01002 | rH129-tdTomato | tdTomato | 顺行跨多级，红色标记 |
| V01001 | VSV-EGFP | EGFP | 顺行跨多级，绿色标记 |
| V01002 | VSV-mCherry | mCherry | 顺行跨多级，红色标记 |
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参考文献