组织总磷含量测定试剂盒
产品名称: 组织总磷含量测定试剂盒
英文名称: Tissue Total Phosphorus Content Assay Kit
产品编号: BC2850
产品价格: 0
产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三
品牌商标: Solarbio
更新时间: 2024-11-16T14:28:57
使用范围: null
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组织总磷含量测定试剂盒产品内容:
试剂一:液体10mL×1瓶,4℃保存(强腐蚀性,强氧化性)。
试剂二:液体11 mL×1瓶,4℃保存。
试剂三:粉剂×2瓶,4℃避光保存。临用前配制,加入10 mL蒸馏水,溶解后再加入5 mL试剂二,混匀。
标准品:液体1mL×1支,1mmol/L K2HPO4无机磷标准液,-20℃保存。
产品说明:
磷的存在形态包括无机磷与有机磷。无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等。通过测定总磷与无机磷含量即可了解作物对磷的利用率,进而为合理施肥提供依据。
总磷经消化后,转化成无机磷。钼蓝法是测定无机磷含量的经典方法,一定条件下,钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量,进而可计算出组织中总磷含量。
自备实验用品及仪器:
可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、蒸馏水和浓硫酸。
组织总磷含量测定试剂盒操作步骤:
一、有机磷消化:
取带盖试管,进入精确称取约0.1 g组织,加浓硫酸1.0 mL,盖紧(防止水分散失)后沸水浴10min左右,待溶液呈黑色或棕色时取出。稍冷后,加试剂一200μL,充分混匀,盖紧后继续沸水浴,直到溶液呈透明状,取出室温冷却后,加蒸馏水3.8 mL,充分混匀;室温,10000rpm,离心10min,取上清液,待测。
二、测定:
1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。
2.打开水浴锅,调节温度到40℃。
3.测定:
试剂名称(μL)
空白管
标准管
测定管
标准液
50
上清液
50
蒸馏水
500
450
450
试剂三
500
500
500
混匀后置于40℃水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,分别记为A空白管、A标准管、A测定管。
三、组织总磷含量计算:
总磷含量(mmol /g FW)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V总÷W
=0.005×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W
C标准液:1 mmol/L;V总:上清液总体积,5 mL=0.005 L。W:样品质量,g。
组织总磷含量测定试剂盒注意事项:
1、试剂三需临用前配制,限当天使用。
2、测定前先用1~2个样品做预实验,如吸光值大于0.8,需用蒸馏水做相应稀释。
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