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小牛肠碱性磷酸酶

小牛肠碱性磷酸酶

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产品名称: 小牛肠碱性磷酸酶

英文名称: Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)

产品编号: 20427ES80

产品价格: 0

产品产地: 翌圣生物

品牌商标: Yeasen

更新时间: 2023-08-17T13:40:59

使用范围: null

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 Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP)

小牛肠碱性磷酸酶

产品信息

产品名称

产品编号

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价格(元)

Alkaline Phosphatase (30 U/μl), Calf Intestine (CIAP) 小牛肠碱性磷酸酶

20427ES80

1000U

-20

936.00

产品描述

Alkaline Phosphatase,中文名碱性磷酸酶,可将DNARNA5’端磷酸基团去除,常用于阻止载体的自连作用:在分子克隆实验中,DNA连接酶催化DNA连接时需要有磷酸基团的存在,载体在经酶切后会在切点端保留一个磷酸基团。而载体经碱性磷酸酶去磷酸化后因5’端无磷酸基团,因而不可以和自身3’端连接。因此连接反应中载体本身会优先发生的连接反应被阻止,提高了目的片段插入率。另外,碱性磷酸酶还可制备用于5’端标记的DNA模板,以及用于该酶蛋白的脱磷酸作用等。

本品为小牛肠来源的碱性磷酸酶,可以降解几乎所有磷酸单酯,但是该酶不能水解磷酸二酯或磷酸三酯。

产品组分

组分编号

组分名称

规格

20427-A

Alkaline Phosphatase (30 U/μl)

1000U

20427-B

10×AP buffer

1ml

产品性质

来源(Source

携带小牛肠碱性磷酸酶表达质粒的酵

质量控制(Quality Control

无核酸外切酶、核酸内切酶、核糖核酸酶污染

热灭活(Thermal Inactivation

在螯合剂存在下,65加热30min99%活性不可逆丧失;使用苯酚,可使酶完全失活。

储存液条件(Storage conditions

10 mMTris-HCl (pH8.0), 1 mM MgCl2, 50mM KCl, 0.1 mM ZnCl2, 50% glycerol.

活性定义(Unit definition

pH9.8, 37条件下,以对**苯酚磷酸盐(p-nitrophenylphosphate)为底物,1分钟生成1µmol**酚(p-nitrophenol)所用的碱性磷酸酶量定义为1个活力单位。

最佳pHOptimal pH

该酶在底物浓度高的情况下其最佳反应pH10,在底物浓度低时,最佳pH8,此时该酶活性较高浓度底物时稍低。

优化体系(Optimal Buffer

AP Buffer (500mMTris-HCl, pH9.0; 10 mM MgCl2)

运输和保存方法

干冰运输。-20保存,本酶在保存条件下及其稳定。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

 

 

 

 

 

使用方法

1 DNA去磷酸化

1.5ml离心管中加入下列试剂:

无菌ddH2O

Up to 50µl

DNA 片段*

1-20pmol

Alkaline Phosphatase

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