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组织无机磷含量测定试剂盒

组织无机磷含量测定试剂盒

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产品名称: 组织无机磷含量测定试剂盒

英文名称: Tissue Inorganic Phosphorus Content Assay Kit

产品编号: BC2840

产品价格: 0

产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三

品牌商标: Solarbio

更新时间: 2024-11-01T11:07:29

使用范围: null

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产品内容:

试剂一:液体50mL×1瓶,4保存。

试剂二:液体10mL×1瓶,4保存。

试剂三:粉剂×2瓶,4避光保存。临用前配制,加入10 mL蒸馏水,充分溶解后加入5ml试剂二,混匀。

标准品:液体1mL×1支,1mmol/L无机磷标准液,4保存。

产品说明:

无机磷主要指磷酸根,参与生物体内多种代谢,包括能量代谢、核酸代谢、蛋白质磷酸化和脱磷酸化等等,此外促进碳水化合物的合成、转化和转运。

钼蓝与磷酸根生成660nm有特征吸收峰的物质,通过测定660nm光吸收,即可计算无机磷含量。

自备实验用品及仪器:

可见分光光度计、离心机、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

操作步骤:

一、无机磷提取:

    称取约0.1g组织,加试剂一1.0 mL冰上充分匀浆,410000rpm,离心10min,取上清液,待测。

二、测定:

1. 分光光度计预热30 min以上,调节波长到660 nm,蒸馏水调零。

2.打开水浴锅,调节温度到40

3.测定:

试剂名称(μL

空白管

标准管

测定管

标准液

 

50

 

上清液

 

 

50

蒸馏水

500

450

450

试剂三

500

500

500

    混匀后置于40水浴保温10min,室温冷却10 min后于660 nm测定吸光度,分别记为A空白管、A标准管、A测定管。

注意:需在40min内完成比色。

三、组织无机磷含量计算:

无机磷含量(mmol/g样本鲜重)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×V÷W

                      =0.001×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)÷W

C标准液:1mmol/LV总:上清液总体积,1mL=0.001 LW:样品质量,g

注意事项:

1、试剂三需临用前配制,限当天使用。

2、测定前先用1~2个样品做预实验,如吸光值大于0.8,需用蒸馏水做相应稀释。

 

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