文库构建服务
产品名称: 文库构建服务
英文名称: 包括cDNA文库、基因组文库、酵母双杂交文库和Phagedisplay文库
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上海英骏生物技术有限公司
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1.cDNA文库构建
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- 标准cDNA文库-采用Invitrogen独有的具有降低RNA酶H活性的Superscript™ III反转录酶,有效保障文库的代表性
- 未剪切cDNA文库—采用Invitrogen专利的Gateway位点特异性重组技术(Cloneminer II cDNA library construction kit),不使用限制性内切酶酶切的步骤,无需担心任何基因被剪切;利用重组酶可以将构建好的cDNA文库穿梭于任何Gateway化的表达载体上
- 全长未剪切cDNA文库—利用独特的富集含5′帽子结构的全长mRNA技术(Oligo-capping),确保获得高度富集的全长cDNA文库;采用Invitrogen专利的Gateway位点特异性重组技术(Cloneminer II cDNA library construction kit),不使用限制性内切酶酶切步骤,无需担心任何基因被剪切;利用重组酶可以将构建好的cDNA文库穿梭于任何Gateway化的表达载体上
- 均一化cDNA文库—通过基因组DNA饱和杂交的原理,将cDNA文库中高丰度的基因拷贝数减少10-100倍,增加克隆低丰度mRNA的机会,减少大规模EST测序的费用
- 消减cDNA文库-应用抑制PCR原理,分离两种细胞或两种组织的细胞中的差异表达基因
- 酵母双杂交cDNA文库-采用Invitrogen专利的Gateway位点特异性重组技术(Cloneminer II cDNA library construction kit)构建双杂交文库;可用于检测存在于蛋白质之间的微弱的或暂时的相互作用
- 标准cDNA文库-采用Invitrogen独有的具有降低RNA酶H活性的Superscript™ III反转录酶,有效保障文库的代表性
2.Fosmid基因组文库构建
- 利用限制性内切酶或机械随机剪切的方式消化基因组DNA,构建Fosmid(插入片段40kb左右);可用于基因组物理图谱的构建,基因组序列分析,基因在染色体上的定位,基因组中基因的结构和组织形式
3.微卫星基因组文库
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应用Dynal磁珠富集的方法构建文库,可用于物种的多态性分析
4、RACE服务
- 利用PCR技术,由已知的部分cDNA序列来从低丰度转录本中快速扩增cDNA末端,利用3′-RACE方法获得该基因的3′端序列,或利用5′-RACE方法得到该基因的5′端序列;利用Invitrogen的GeneRacer™试剂盒,可大大提高扩增全长cDNA末端序列的效率,有机会得到每个细胞中拷贝数低至30的稀有转录本的全长5′和3′末端,可以由长度至少为9kb的转录本得到全长cDNA。