中科院抗体研究中心 www.antibodyweb.com

张东  02164759190    dzhang@imb.sh.cn

制备单克隆抗体
制备单克隆抗体（ 4至 6 个月）
杂交瘤细胞株制备服务
在实验过程中为尽量减少被传染性病菌感染的危险，同时又要尽可能增强抗原的免疫反应，我们采用无特殊病原体小鼠 ( SPF mouse )；同时为了达到最佳的免疫效果，在融合前，免疫动物需要较长的时间，因此杂交瘤细胞株的制备需要 4 至 6 个月的时间。为降低顾客方实验风险，我们分二个阶段制备杂交瘤细胞株，顾客方需分步付费：

 第一阶段：免疫小鼠
设计实验方案；
 实验动物：5 只 6 至 8 周龄 BALB / C 小鼠；
 顾客方需提供抗原样品 > 7 mg,，纯度 > 90 .抗原经 SDS-PAGE 检测。若达不到要求的抗原顾客仍坚持启动项目，风险由顾客承担；
 每只 BALB / C 小鼠至少免疫数次，每次免疫后均用 ELISA 测定抗体效价；
 验收方式：通过 ELISA 方法进行检验；
验收标准：免疫后的小鼠血清与客户方提供的抗原样品有特异性结合，抗血清效价在 1：10,000 以上
 顾客方认可后，杂交瘤细胞珠进入第二阶段制备，否则合作终止。

第二阶段：分泌抗体的杂交瘤株的建立
 免疫细胞与骨髓瘤细胞融合，通过选择和筛选以及克隆化，最终提供 2 至 3 个克隆的杂交瘤，以及相应的杂交瘤克隆培养物上清液或少量腹水，并附杂交瘤克隆建株过程的总结报告（包括融合、克隆过程，抗体效价以及抗体免疫球蛋白克隆的亚型）。
 验收方式：通过 ELISA 方法进行检验；
 验收标准：提供的杂交瘤培养物的腹水（或上清液）与顾客方提供的抗原样品有特异性结合，同时抗体特异性只针对客户方提供的抗原样品做出保证。

最终提供：2 至 3 株杂交瘤细胞株和少量腹水（或上清液），并给出相应的鉴定报告（包括单抗的亚型）。