冻存复苏全套试剂(基于传统方案）：

Complete set of cryopreservation and recovery reagents

(干细胞验证） 100ml 价格800

胎牛血清（种子库级别） 100ml 价格1600

培养基（种子库级别） 500ml 价格 120

胰酶（种子库级别） 100ml 价格 120

专用冻存盒： 500

20240618

种子库更新优化，单克隆建议细工POTOCOL,适合杂交瘤融合后单克隆、工程株、稳转株、耐药株、重要实验克隆株筛选、成瘤不稳定株克隆筛选、准株筛选（老手适合）

以下问题困扰实验并不顺利，配合我司胰酶配套。

成团成片，转染效率不高（悬浮免疫，原代请注明）堆叠式生长（类似类器官），原代首代传代后消化不下来（该问题简单解决是，在培养瓶用前铺曾血清）高级解决来信告知详情，给出参考建议(近年流行关键词：反转法，免疫类促贴壁转染，原理都差不多）

为更优质精准服务用户，所用试剂耗材，厂家，货号，操作步骤，预期要求告知。

可用复苏活率不高细胞验证，原代，细胞系都可以，告知细胞名称，生长特性，以前冻存方法，活率多少（是否含血清），目的要求，目前原代PBMC案例活率90%,三年统计数据，案例很稳定。

20240629

对冻存挑剔细胞THP-1（免疫类）、胰岛胰腺类（原代，系）上皮类、原代、原代血液类
更挑剔细胞：耐药株，稳转株，国内建系，生产用种子库、各类原代。
后面碰到无解无文献支撑等难点痛点都可以讨论。（细工为国内建系，超量培养，维持培养做些技术储备目的，比正常系，原代增殖天数差距太大，适合细节讨论，提升增殖速度，主路线提供简易可行方法，提升组织细胞活性，含血清解决为主快，无血清涉及周期长慢，培养基中各组分统计开始）

讨论上述对细胞冻存细胞平时验证推荐，讨论理由，就是冻存前消化成单个，胰酶敏感重要性，这个我们总结有，巨噬系，原代，免疫系，肝类、原代，胰岛胰腺，上皮，腺类，腺类神经类共存系，淋巴类SV40,hTERT
THP-1,正常细胞系。生长特性：成团成片，堆叠生长。（试剂耗材种子库理念一致，要找到复苏活率稳平，多年长时间验证）
这步解决好了，在用经典冻存（经典一定要自己预实验为准），建议做到理想效率是，不管是那种细胞（，活率都在80%以上
细工方案要点提示：①冻存前胰酶处理（细工胰酶经过胰酶敏感细胞测试，提高活率关键步骤，这部验证成功，还可用到转染前细胞质量提升，大大增加转然后成功率，其他救助办法这里不展开，有需要可来信讨论）。②高质量血清，这部分验证成功，后面种子库试剂，正规库来源细胞救助，试验后死细胞过多，细工是通过免疫细胞，巨噬分化比较了不少厂家。实验涉及到分化影响可发试用比较。③促贴壁：特别是上皮类，这类包括很多难养系大部分是上皮类、腺与神经、免疫类特点都包含得系，特点是容易成球，成球速度比贴壁速度要快，我们持续统计这类问题解决目的是建系，和规模培养为后续超量培养，维持培养做些技术储备。目前有些小进展，涉及方法太多，这类先不阐述，有兴趣用户可来信讨论。
您建系，我全程陪同，总觉得冻存复苏这个很重要。

20240703

国内建系优化驯化细工优势：从几类难养特点，通过精筛，粗筛多种简单易行方法，难点提前讨论沟通，细工实践案例资料铺垫，继续问题统计与适合国内体系培养体系与建系特点，给些参考建议，各地有实验室条件实验室，理念一致，共享技术部份。

20240901

种子库-细工整套冻存复苏试剂备份组
冻存方法推荐：DMSO10%+FBS90%
对冻存复苏要求更高，可用案例细胞用细工推荐程序降温盒+棉花冻存细胞，国内建系推荐有一备份组按上述方法。
细胞培养最终目的-平稳的细胞状态，
常用的细胞三年做冻存复苏验证
难养细胞1-1.5年做冻存复苏验证
增强贴壁试剂辅助复苏验证优势：活率及状态都有明显提升，三年以上冻存复苏可做比较验证，活率及细胞舒展通过几天复苏后就可得到明显差别（救助案例多），该点优势在复苏上能有明显效果，后面有条件实验室，在平时培养中也是同理提高细胞增殖及状态，转染后传代死细胞多一种技术储备，也可用同理方法做比较。
注：
1：成片成团冻存前要解决，参考我司优化胰酶特点。
2：高质量血清在冻存复苏中非常关键，也建议有条件组，把平时采购血清前验证作为一个关键指标，其他细胞验证血清都可讨论。

20240929

北京地区，有种子库级别要求实验室，我司全套材料案例备份验证，细胞等水试剂全部提供一起验证，进口耗材要求，293，293T 建库细工备份方案，延展高滴度病毒生产，原代建系，晶体相关研究，二倍体生产直接到中式，都可讨论并一起合作建库，如验证顺利，国内库来源细胞陆续补充，有重点研究方向组，列出组织类别研究方向，海归老师，可全方位了解国内培养体系特点，细工大部分常规问题解决思路与配套试剂，痛点难点小成绩突破（学习海外实验室好习惯为主）。需要我们potocol的，邮件标明。

20240930

各地重点室长期合作目的
细胞全部来自国内正规库，案例细胞为国产备份水试剂体系做好充足冗余条件，长期验证，也与用户讨论新型试剂化学成分对细胞相关产品开发，该理念技术对接二倍体生产到中式无BUG,自动化培养转染冗余试剂也是我司开发重点（冗余水试剂及工艺）目前这套已在工业生产上有应用，也为工厂提前做些人才储备。有的设备比较贵重，实验室单独上可行性不高，我们可协作去工厂完成中式级别实验。

例如后面自动化转染，痛点就在精准细胞SOP培养控制，软件硬件结合。冗余试剂开发理念凸显，2018年我司增强贴壁试剂工业应用第二年就开始开发这类需求试剂，当时目的是给操作人员更多容错空间试剂深度优化，了解产品，并深入理解，难点痛点问题反复验证。后面我们会列出冻存复苏案例相关前言技术，并与合作实验室一起统计开发，开发思路来源，就是冻存复苏各种挑剔细胞中问题。并长期验证，列出这个需求有些内容不能详尽告知，看下相关产品后两年大事件。

20241012

自动化样本库-冻存复苏冗余试剂统计
冗余冻存试剂开发持续模式，试剂+温度监控设备长期评测
主传统技术优化，DMSO+血清
次新品开发思路可行性：玻璃化干细胞冻存复苏应用，临床样本冻存复苏目的数据统计，

案例方向-冻存复苏挑剔痛点类细胞
原代细胞自动化培养优化讨论可行性-化学成分对细胞长期影响讨论技术数据统计（离体技术方法统计）
马立克疫苗生产应用讨论
肝细胞原代
国内建系细胞，技术部分全部共享
临床免疫细胞冻存复苏（建系目的）
可共享原代已有技术评测
高通量、自动化、标准化。大厂应用数据评测，可行性讨论，冗余试剂研发问题目的各种痛点问题统计（二倍体工程细胞应用科研，生产，自动化设备+冗余试剂（技术）纯国内技术生产备份）案例细胞统一标准验证可行性。

延展应用：生物制药，基因工程，细胞培养，细胞工程，实验动物 重组蛋白，动物保健，基因工程，样本库 生物

参与
制冷设备研发生产商-控冰检测设备基础数据统计。

20241013 

推荐统计细胞，
施万(雪旺）及配套类器官各种组织 造血原代，原代免疫，原代自建，
系L5178Y HL-60 A549 MDCK ,二倍体

试剂部分
传统成分：丙三醇、二甲基纤维素（DMSO) 聚乙烯吡咯烷酮( pvp) 聚乙二醇(PEG) 羟乙基淀粉(HES)
辅助：胶原 透明质酸钠 硫辛酸 谷二肽 环二肽 甘露聚糖 氯化钠 海藻糖
培养基成分添加
重组人血清白蛋白、复合抗氧化剂、抗菌剂、缓冲液、注射用水
L-异亮氨酸、L-异亮氨 、L-亮氨酸、L-醋酸赖氨酸、L-甲硫氨酸、L-苯丙氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-缬氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-组氨酸、L-脯氨酸、L-丝氨酸、、亚硫酸氢钠、

检测控冰，安瓿瓶温度探针

上述试剂，设备生产厂家路过，可给我司留言，有兴趣参与研发都没问题。有兴趣老师课题组，要有兴趣欢迎参与，

冻存复苏是国内细胞建系关键步骤，难点细胞统计意义积极。
各种冻存复苏痛点问题都可讨论。各种难养，成团成片等各种特点细胞技术储备足。北京，天津，可面谈讨论。
相关技术老师有兴趣可参与，加我微信。这次冻存复苏统计涉及的冷藏技术，工业工程类技术，较多。

有相关例在应用，我们可给些备份方案，国内种子库我司也可参与备份体系验证等，路过大牛老师如果深入研究统计过，可讨论共同验证，及灵活的合作方式。

20241102

免疫细胞建系参考

1：建系目的，含血清方案（重复容易,成本低）结合简易单克隆法，克隆单细胞确保目的细胞，主单克隆群体增殖无影响（分出细胞在做鉴定）
2：避免外力（机械力，化学力）影响建系，国外样本库自动化研究已有案例介绍）
3：聚丙烯管进行进行细胞处理和分选，15%FBS+1640
4：可讨论最佳温度（4°C或15°C或室温）
5：低俗离心（国外样本库，没有拿到具体数据），国内经验谈，1000转（10分钟内）
6：冻存复苏：目前细工最优方案，DMSO8-10%+FBS40-90%,冻存前我司优化胰酶消化后成单个状态，比吹打成单个活率大大提升。新型冻存液有一年以上冻存复苏案例的，我们可配合免费推广。

离心机研发生产厂家，纳米磁珠分选免疫细胞研发生产厂家，路过可深入讨论，要能共享FAQ,我们可共享验证。
如流式告知型号，最佳培养基和细胞最佳浓度我们做些最佳方案推荐。
死细胞验证：低浓度碘化丙啶（PI），鉴别染料7-AAD告知厂家货号，我们统计下各厂家优略后，讨论试公布参考结果。
自动化培养需冗余试剂配合，我司建系目的，技术老师路过多多支持。