组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒产品内容：

提取液：液体30mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂二：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。

试剂三：液体30mL×1瓶，4℃避光保存，变成蓝绿色不能使用。

标准品：液体0.5mL×1支，2μmol/mL酚标准液，4℃保存。

组织及血液碱性磷酸酶(AKP/ALP)活性检测试剂盒产品说明：

AKP/ALP是一种含锌的糖蛋白酶，在碱性环境中可水解各种天然及人工合成的磷脂单酯化合物。AKP/ALP广泛分布于人体各脏器中，以肝脏为主。

在碱性环境中，AKP/ALP催化磷酸苯二钠生成游离酚；酚与4-氨基安替比林和铁*化钾反应红色亚醌衍生物，在510nm有特征光吸收；通过测定510 nm吸光度增加速率，来计算AKP活性。

自备仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、冰和蒸馏水。

操作步骤：

一、 粗酶液提取：

称取约0.1g组织，加提取液1mL充分研磨，4℃，10000rpm离心10min，取上清液待测。血液可直接用于测定，或者适当稀释后用于测定。

二、 测定操作：

1.分光光度计预热30 min以上，调节波长到510 nm，蒸馏水调零。

2. 试剂一置于37℃水浴中预热30 min以上。

三、AKP/ALP活性计算： 

1.按蛋白浓度计算

活性单位定义：37℃中每毫克蛋白每分钟催化产生1 μmol酚为一个酶活力单位。

AKP/ALP (U/mg prot)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样]÷(Cpr×V样)÷T

                   =0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷Cpr

2.按样本鲜重计算

活性单位定义：37℃中每克组织每分钟催化产生1 μmol酚为一个酶活力单位。

ACP活力(U/g鲜重)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷(W÷V提取×V样)÷T=0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管) ÷W

3.血液中ACP活性计算

活性单位定义：37℃中每毫升血液每分钟催化产生1μmol酚为一个酶活力单位。

ACP活力(U/mL)= [C标准品×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)×V样] ÷V样÷T

               =0.133×(A测定管-A对照管)÷(A标准管-A空白管)

    C标准品：2μmol/mL；V反总：反应体系总体积（mL），1020μL=1.02mL； V样：加入反应体系中上清液体积（mL），0.02mL；T：反应时间（min），15 min；V提取：加入提取液