细胞培养全套解决方案
产品名称: 细胞培养全套解决方案
英文名称: Cell culture complete solution
产品编号: 001
产品价格: 100
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更新时间: null
使用范围: null
Cytiva(思拓凡)
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Hyclone一直提供高品质胎牛血清及其他血清产品,同时hyclone提供各类经典细胞培养基,不断更新的无血清和无蛋白培养基,还可以根据客户的配方要求定制生产培养基,全方位满足科研及生物制药领域的细胞培养需求。
细胞培养中的问题
问题 | 可能原因 | 解决方案 | 推荐 |
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培养细胞不贴壁 | 1.胰蛋白酶消化过度 2.支原体污染 3.培养基pH值过碱(NaHCO3分解) 4.细胞老化 5.接种细胞起始浓度太低或太高 |
1.缩短胰蛋白酶消化时间或降低胰蛋白酶浓度 2.分离培养物,检测支原体。清洁支架或培养箱。如发现支原体污染,丢弃培养物 3.充入无菌CO2 4.启用新的保种细胞 5.调节最佳接种细胞浓度 |
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悬浮细胞成簇 | 1.培养液中含钙、镁离子; 2.支原体污染; 3.蛋白酶过度消化使得细胞裂解;4.DNA污染 |
1.用无钙镁平衡盐溶液洗涤细胞,轻巧吹吸细胞获得单细胞悬液; 2.分离培养物,检测支原体; 3.用DNaseI处理细胞 |
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培养细胞生长缓慢 | 1.由于更换不同培养液或血清; 2.培养液中一些细胞生长必需成分如谷氨酰胺或生长因子耗尽或缺乏或已被破坏; 3.培养物中有少量细菌或真菌污染; 4.试剂保存不当; 5.接种细胞起始浓度太低; 6.细胞已老化; 7.支原体污染 |
1.比较新培养液与原培养液成分,比较新血清与旧血清支持细胞生长实验,让细胞逐渐适应新培养液; 2.换入新鲜配置培养液,或补加谷氨酰胺及生长因子; 3.用无抗生素培养液培养,如发现污染,丢弃培养物; 4.血清需保存在-10到-20℃。培养液需在2-8℃避光保存。含血清完全培养液在2-8℃保存,需在1周内用完 ; 5.增加接种细胞起始浓度; |
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培养细胞生长不好 | 1.细胞本身的状态 2.污染 3.培养基或血清 4.培养环境 |
1.注意细胞的本身状态:如传代次数、接种量等; 2.避免产生污染(用正规、合法、可溯源的血清) 3.要用合适的血清或培养基,最好经过验证 4.注意实验室的环境 |
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培养细胞死亡 | 1培养箱内无CO2; 2培养箱内温度波动太大; 3细胞冻存或复苏过程中损伤; 4培养液渗透压不正确; 5培养液中有毒代谢产物堆积 |
1.检测培养箱内CO2; 2.检查培养箱内温度; 3.取新的保存细胞种; 4.检测培养液渗透压; 5.换入新鲜培养液 |
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