2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液10149ES
产品名称: 2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液10149ES
英文名称: 2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix
产品编号: 10149ES03
产品价格: 0
产品产地: Yeasen
品牌商标: Yeasen
更新时间: 2023-08-17T13:40:59
使用范围: null
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2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液
产品信息
产品编号 |
规格 |
价格(元) |
|
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液 |
10149ES01 |
100 μL |
93.00 |
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液 |
10149ES03 |
1 mL |
553.00 |
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液 |
10149ES08 |
5×1 mL |
1453.00 |
产品描述
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix高保真酶预混液是即用型2×预混合溶液,包含Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase,dNTP以及优化的缓冲体系。预混液中添加了Hieff Canace® Gold High-Fidelity DNA Polymerase的热启动因子,极大提高了扩增的检出率和产物的特异性。预混液中添加了延伸因子使得该酶具有长片段扩增能力,扩增目的片段的长度可长达10 kb,该酶具有5’→3’DNA聚合酶活性和3’→5’核酸外切酶活性,其保真性是Taq DNA聚合酶的52倍,是普通Pfu DNA聚合酶的6倍。扩增速度可达15 sec/kb。适用于复杂模板的扩增,扩增产物为平末端。
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,反应体系只需加入引物和模板即可,并可以通过两步法的程序进行扩增,简化了实验步骤,节省了时间。本产品中不含染料,PCR产物需加入Loading buffer后进行电泳。另外,该产品还含有特异保护剂,使得预混液反复冻融后仍可维持稳定活性。
产品应用
基因克隆;复杂DNA模板扩增;高通量建库。
质量控制
核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -Hind Ⅲ,37℃下孵育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1 μg λDNA,37℃温育4 h,DNA的电泳谱带无变化。
大肠杆菌残留DNA检测:50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1%琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。有效期2年。
注意事项
1)解冻后Master Mix可能出现晶体沉淀,使用前务必涡旋振荡混匀至沉淀消失,不影响试剂性能。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
推荐PCR反应体系(冰上配制)
组分 |
体积 |
终浓度 |
ddH2O |
to 50 μL |
- |
DNA模板 |
适量 |
- |
Primer正向 (10 μM) |
2.5 μL |
0.5 μM |
Primer反向 (10 μM) |
2.5 μL |
0.5 μM |
2×Hieff Canace® Gold PCR Master Mix |
25 μL |
1× |
【注】: 1)聚合酶终浓度:在1×预混液含有1 U/50 μL的聚合酶。
2)引物:PCR反应体系中引物终浓度的范围为0.2-1 μM,推荐0.5 μM。
3)Mg2+、dNTP终浓度:在1×预混液含有1.5 mM Mg2+和200 μM的dNTP。
4)不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系):
模板种类 |
扩增片段1 kb-10 kb |
基因组DNA |
50 ng-200 ng |
质粒或病毒DNA |
10 pg-20 ng |
cDNA |
1-5 μL (不超过PCR反应总体积的1/10) |
PCR扩增程序:有以下三种程序可选择,优先选择两步法程序。
两步法程序(优先推荐):
循环步骤 |
温度 |
时间 |
循环数 |
预变性 |
98℃ |
3 min |
1 |
变性 |
98℃ |
10 sec |
30-35 |
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