大肠杆菌表达重组蛋白
产品名称: 大肠杆菌表达重组蛋白
英文名称: Expression of recombinant protein in Escherichia coli.
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大肠杆菌表达重组蛋白
步骤一引物设计、模板提取、基因扩增、载体构建、基因测序。
步骤二重组质粒 DNA 导入感受态细胞,通过SDS-PAGE 或其它检测评定小量表达结果,评估目的蛋白表达量。
步骤三大量表达和纯化,并分析表达蛋白。蛋白生产时间 3-8 周杆状病毒表达重组蛋白昆虫杆状病毒表达系统能有效的弥补大肠杆菌表达系统的缺陷,杆状病毒表达的外源基因产物可以得到各种翻译后修饰,包括磷酸化、糖基化、酰胺化、信号肽切割、二硫键形成等,式表达有功能重组蛋白的理想工具。
主要步骤包括重组杆状病毒载体构建、载体和病毒共转染昆虫细胞、筛选重组病毒、病毒滴度放大、小量和大量感染昆虫细胞、获得蛋白。