甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶

产品及特点

Fpg (甲酰胺嘧啶 [fapy]-DNA 糖基化酶) 也称作 8-氧代鸟嘌呤 DNA 糖基化酶（OGG)，既有 N -端糖基化酶活性也有 AP-裂解酶活性。N -端糖基化酶活性可以切下双链 DNA 上受损的嘌呤碱基，产生一个脱嘌呤 (AP) 位点。AP-裂解酶活性可以切割 AP 位点的 3 或 5 端，因此可以除去 AP 位点，产生一个具有 3 和 5 磷酸的碱基缺口。被 Fpg 识别并切除的受损碱基包括：7,8-二羟基-8-氧代鸟嘌呤 (8-氧代鸟嘌呤) 、8-羟基腺嘌呤、fapy-鸟嘌呤、甲基-fapy-鸟嘌呤、fapy-腺嘌呤、黄曲霉毒素 B1-fapy-鸟嘌呤、5-羟基-胞嘧啶和 5-羟基尿嘧啶。

具体有下列特点：

1. 单细胞凝胶电泳 (彗星试验),彗星试验的推荐稀释倍数，1:103～1:104

2. 碱性析出

3. 碱解旋

4. 修饰的切刻平移技术

活性单位定义

1 单位指在 10 μl 反应体系中，37℃ 1 小时，能够切割 1 pmol 含单个与胞嘧啶配对的 8-氧代鸟嘌呤的 34 bp 寡核苷酸双链所需要的酶量。

反应条件

1X Buffer+ BSA [10 mM Bis Tris 丙烷-HCl，10 mM MgCl2 ，1 mM DTT(pH 7.0 @ 25℃) ]。加入100 μg/ml BSA。37℃ 温育。

Buffer 成分

20 mM Tris-HCl，50 mM NaCl，0.5 mM EDTA，200 μg/ml BSA，50%Glycerol，pH 8.0 @ 25℃

热失活

60℃ 10分钟。