Q Sepharose 6FF重力柱说明书

货号：YA2520

规格：1*1mL / 1*5mL / 5*1mL / 3*1mL+1*5mL / 5*5mL

保存：2-8℃

产品说明：

      Q Sepharose 6FF 是一种强阴离子交换树脂，离子交换基团为-O-CH₂CHOHCH₂OCH₂CHOHCH₂N⁺(CH₃)₃ ，本产品以高交联的6%琼脂糖为介质，可耐受较高的流速及更高的化学稳定性，适合实验室及工业大规模纯化。离子交换树脂广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质、核酸及多肽的分离纯化。

表1：介质性能参数

纯化流程：

1、Buffer 的准备 

所用水和缓冲液在使用之前建议用0.22μm或0.45μm 滤膜过滤。

所使用的平衡液和洗脱液，根据不同离子交换填料自行选择基。本原则是低盐上样，高盐洗脱。

2、样品准备 

样品在上样前建议离心或用0.22μm或0.45μm 滤膜过滤，减少杂质，提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

3、样品纯化 

Q Sepharose 6FF重力柱使用请参考以下说明，各溶液用量均按照柱体积计算（柱体积是指填料的体积）。使用流程请参考下图。

       Step 1：柱子平衡；Step 2：上样；Step 3：洗杂；Step 4：洗脱

1) 水洗：将Q Sepharose 6FF重力柱固定在铁架台上，依次去掉上端塞和下端塞，使液体流出。当柱内剩余液面略高于上筛板，用5个柱体积的去离子水清洗填料，去除保护液。

2) 平衡：当液面略高于上筛板，向柱管中加入至少5个柱体积的平衡液，进行平衡，使填料处于与目的蛋白相同的缓冲体系下，起到保护蛋白的作用。

3) 上样：将样品加到平衡好的重力柱中，样品保留时间至少2min，保证目的蛋白与介质充分接触，提高目的蛋白的回收率。收集流出液，用于SDS-PAGE分析蛋白质的结合情况，在出现问题时，更方便寻找解决问题的方案。

4) 洗杂：用10-15倍柱体积的洗杂液进行清洗，去除非特异性吸附的杂蛋白，收集洗杂液。

5) 洗脱：采用一步法或线性梯度洗脱。一步洗脱中，通常5-10倍柱体积洗脱液就足够了。梯度洗脱可以选用 20 倍柱体积或更多，来分离不同结合强度的蛋白质。

6) 水洗：用2-3倍柱