支原体污染的危害

支原体是实验室中常见的污染细胞的原核生物，据统计约有15%－35%的细胞被支原体污染。支原体会改变宿主细胞的结构和功能等一系列特征，造成实验结果不准确；干扰细胞代谢和生长，改变核酸合成，影响细胞抗原性，导致染色体改变，干扰病毒复制以及模仿病毒的作用。因此，每一株外来细胞在进入实验室之前，都应进行支原体检测，并且应对培养中的细胞定期（如每2-3个月）进行支原体检测服务。

建立定期的监控方案，有助于提高科研效率，在污染发生早期及时处理，可避免支原体污染造成更大损失！

原理

利用qPCR（TaqMan探针法）检测支原体DNA，反应体系中同时存在标记两种颜色TaqMan探针及相关引物，分别检测支原体DNA和内模板。

支原体检测优势

1、灵敏度：qPCR法最低的稳定检测至10拷贝的支原体DNA。

2、稳定：qPCR法全程闭管操作，无产物交叉污染。

3、可靠：通过内参扩增效率的检测，可有效检测试剂盒质量，样本中各类PCR抑制剂的影响，避免假阴性。

4、方便：操作简单，无需后期跑电泳步骤。

5、定量：通过CT值判断，可进行定量检测。结果可分为：阴性、弱阳性、阳性、强阳性，给科研人员提供更多的有用信息。

结果判断PCR模板支原体(FAM)CT值判定说明阳性对照26±3阳性成立>30阳性不成立阴性对照>34阴性成立<34阴性不成立待测样品

（内参CT值<30）>34阴性30-33灰区，需验证25-29弱阳性19-24阳性<19强阳性