JM110 感受态细胞 JM110 Chemically Competent Cell

产品规格: JM110 10×100μl pUC19（control vector） 10pg/μl 10μl rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F′ [traD36 proAB lacIq lacZΔM15]  JM110 菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR) ；是甲基化基因 dam、dcm 缺失的菌株，提取得到的 质粒 DNA，可被对 dam、dcm 甲基化敏感的内切酶切割； lacIq lacZΔM15 的存在使 JM110 可以进行蓝白斑筛选，但转化效率不高，High5TM系列 JM110 感受态细胞经特殊工艺制作，经 pUC19 质粒检测转化效率约 107 cfu/μg。一般不用于质粒构建，只适用 于质粒转化。 1. JM110 感受态细胞放置冰中融化（或放手心或室温片刻，待菌体处于冰水混合状态时迅速 插入冰中），加入目的 DNA 并用手拨打 EP 管底轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。 2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。 3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基（2YT 或 LB），混匀后 37℃，200 rpm 复苏 60 分 钟。4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。 5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。 1 感受态细胞最好在冰上融化。 2. 混入质粒时应轻柔操作。 3. 转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。