ECL化学发光检测试剂盒
产品名称: ECL化学发光检测试剂盒
英文名称: ECL Western Blotting Detection System-BestBio
产品编号: 320001(新货号BB-3501)
产品价格: 0
产品产地: BestBio贝博
品牌商标: BestBio贝博
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BestBio贝博专注于生命科学领域研究用试剂产品的研究、开发和市场推广。
贝博有一支技术力量强大的研发团队,包括分子生物学、免疫学、蛋白质研究、细胞生物学等方向的产品研究开发。
贝博建立了高标准的质检系统,产品从原料、半成品、成品入库到销售之前,每一个环节都有严格的质检标准,并以标准的生产工艺,保证产品质量的稳定性。
BestBio贝博全部人员均拥有本科以上学历,其中硕士以上人员占60,贝博团队具备雄厚的技术力量,能够为客户在产品购买和使用的整个过程中提供全方位的技术支持与服务。
BestBio-贝博将以高品质的产品和服务打造中国最具实力的试剂品牌。
BestBio-贝博产品包括:
Trizol、Taq、PCR Mix、RT-PCR试剂盒、Real Time PCR、DNA Marker、转染、分子克隆、二抗、Western Blot、ECL试剂盒、蛋白定量、蛋白提取、蛋白Marker、细胞凋亡等
免疫印迹最重要也是最后一步就是酶与底物反应进行检测,本试剂盒以化学荧光发光方法检测蛋白质或核酸类生物大分子。其原理是,蛋白质或核酸在电泳后转移到印迹膜上,以一抗及辣根过氧化物酶HRP标记的二抗结合膜上的目的蛋白,或以HRP标记的探针直接或间接结合膜上的核酸。洗膜后用本产品配制的ECL工作液,在可见光下室温孵育膜数分钟,将印迹膜用保鲜膜包被粘贴固定于X光片曝光暗盒。然后转入暗室将X光胶片压在膜上曝光数秒到数分钟至数小时。显影定影后蛋白质或核酸条带可清晰显示在X光胶片上。也可不进行X光胶片曝光直接对印迹膜进行荧光CCD扫描
使用方法:
1. 使用合适的方法进行 Western,直至用PBST洗涤二抗。
2. 新鲜配制ECL工作液:试剂I和试剂II按1:1混合后, 用双蒸水10倍稀释,混合后即为ECL工作液。须立即使用!
3. 印迹膜蛋白面朝上,用ECL工作液均匀滴加至印迹膜室温孵育1-2分钟。ECL工作液使用量大约为0.125ml/cm2膜或根据个人实验习惯使用。
4. 用平头镊夹住印迹膜,垂直置于吸水纸以吸去多余工作液。
5. 快速将印迹膜置于二层保鲜膜之间,尽量赶尽气泡。
6. 将印迹膜蛋白面朝上,放于X光胶片暗盒内。
7. 在暗室内放入X光片,曝光,显影。
注意事项:
1. ECL工作液配制过程中吸取试剂I和试剂II时务必跟换吸头,工作液新鲜配制后立即使用,放置过久会影响灵敏度。
2. 根据蛋白丰度不同曝光时间可能是数秒至数小时。
3. 曝光时间过长会使背景加深,曝光不足会导致条带模糊。
4. 如果曝光后条带不佳,可用洗膜缓冲液洗膜,重新孵育二抗,然后重新用ECL发光和曝光。
5. 应使用高质量保鲜膜。