免疫细胞无血清培养基（CIK）
产品名称： 免疫细胞无血清培养基（CIK）
英文名称： Immune Cells Serum Free Media（CIK）
产品编号： NC0101
产品价格： 0
产品产地： 北京
品牌商标： yocon友康
更新时间： null
使用范围： null
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【免疫细胞无血清培养基(CIK) 用途与描述 】
免疫细胞无血清培养基，用于脐带血或外周血中分离到的单核细胞向CIK细胞（细胞因子诱导的杀伤细胞）的体外诱导及体外大规模扩增培养。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 规格与保存 】
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2L培养体系免疫细胞无血清培养基套装： |
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产品名称 |
描述 |
规格 |
保存条件 |
保存期限 |
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免疫细胞无血清 |
免疫细胞体外培养 |
1000mL/瓶*2 |
2-8℃保存 |
12个月 |
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CIK细胞诱导 |
YC001起始培养时添加 |
1支 |
-20℃保存 |
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YC002接种24h后添加 |
1支 |
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YC003接种24h后添加 |
1支 |
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YC004接种24h后添加 |
1支 |
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YC005添加至培养基中使用，1支/L |
2支 |
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3L培养体系免疫细胞无血清培养基套装：适用于100mL外周血的样本量，使用3L培养基。 |
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产品名称 |
描述 |
规格 |
保存条件 |
保存期限 |
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免疫细胞无血清培养基(CIK) |
免疫细胞体外培养 |
1000mL/瓶*3 |
2-8℃保存 |
12个月 |
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CIK细胞诱导因子试剂盒 |
YC001起始培养时添加 |
1支 |
-20℃保存 |
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YC002接种24h后添加 |
1支 |
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YC003接种24h后添加 |
1支 |
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YC004接种24h后添加 |
1支 |
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YC005添加至培养基中使用，1支/L |
3支 |
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【免疫细胞无血清培养基(CIK) 使用方法】
1、采集与分离外周血
采集外周血，Ficoll密度梯度离心分离收集单个核细胞。
2、单个核细胞的接种与诱导活化
1) 0d时，绷胞计数。按细胞密度2x106cell/mL接种至对应体积的培养液中。
添加诱导因子YC001一支。添加10%比例的自体血浆。
2) ld时(24小时)，添加诱导因子YC002、YC003、YC004至已经接种细胞的培养液中。
将YC005添加至未经使用的培养基中，待用。
3、细胞的连续培养与扩增
1) 3d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。同时添加新加入培养液体积l0%比例的自体血浆。补液比例大致在1：2左右（原有培养液体积：新加培养液体积）。
2) 5d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1：3左右。
3) 7d时，补入新鲜培养液，调整细胞密度至(0.6-0.8)x106cell/mL。补液比例大致在1：2左右。
4) 9d时，将剩余培养液全部加入。
4、收获细胞
培养周期结束后，依据细胞量收获细胞。
【供参考的补液程序范围】
2L培养体系补液体积示意表：50mL外周血，接种密度2.0x106 cell/mL。
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天数 |
操作方式 |
原有培养液 |
新加培养液 |
培养液 |
血浆添加 |
因子添加 |
备注 |
|
0d |
接种 |
0 |
25 |
25 |
2.5 |
YC001 |
T75瓶 |
|
1d |
诱导 |
YC002 |
|||||
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3d |
补液 |
25 |
50 |
75 |
5 |
换瓶 |
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|
5d |
补液 |
75 |
225 |
300 |
转培养袋， |
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7d |
补液 |
300 |
700 |
1000 |
每袋补350mL |
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|
9d |
补液 |
1000 |
1000 |
2000 |
每袋补500mL |
备注：
1)补液后推荐优密度区间为(0.6-0.8)x106cell/mL。若按体积补液与推荐密度区间有冲突的话，请以推荐密度区间为准。
2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可，但应建立在丰富的样本量基础之上。
3)外周血量少于50mL，应使用的补液程序，请联系本公司免费索取。
3L培养体系补液体积示意表：100mL外周血，接种密度2.0x106 cell/mL。
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天数 |
操作方式 |
原有培养液 |
新加培养液 |
培养液 |
血浆添加 |
因子添加 |
备注 |
|
0d |
接种 |
0 |
50 |
50 |
5 |
YC001 |
T175瓶 |
|
1d |
诱导 |
YC002 |
|||||
|
3d |
补液 |
50 |
100 |
150 |
10 |
|
|
|
5d |
补液 |
150 |
450 |
600 |
转培养袋， |
||
|
7d |
补液 |
600 |
1400 |
2000 |
每袋补700mL |
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|
9d |
补液 |
2000 |
1000 |
3000 |
每袋补500mL |
备注：
1)补液后推荐密度区间为(0.6-0.8)x106cell/mL。若按体积补液与tuiji密度区问有冲突的话，请以最优密度区间为准。
2)纯粹按固定体积接种与补液并非不可，但应建立在丰富的样本量基础之上。
3)外周血量少于100mL，应使用的补液程序，请联系本公司免费索取。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 产品性能之外周血样本】
1. 细胞总数：125亿，折合62.5亿/L。
2、CD3+CD56+阳性率在25%-55%
3. 细胞支持密度更高。
培养14天后，细胞密度可至5.7×106cell/mL。培养15天后，细胞密度可至6.2×106
cells/mL。
4. 培养后期补液结束后，细胞维持能力更强。
最后一次补液（9d），持续至17天，细胞数量一直维持增长，未见明显下降。
【免疫细胞无血清培养基(CIK) 产品性能之脐带血样本】
50mL脐带血
细胞生长曲线
CIK细胞阳性率
