核糖核酸酶A，来源于牛胰腺

 产品信息

核糖核酸酶A，来源于牛胰腺产品描述

核糖核酸酶A（Ribonuclease A，常用缩写RNase A），一种含4个二硫键的单链多肽，分子量约为13.7kDa（氨基酸序列）。作为一种核糖核酸内切酶（endoribonuclease），特异性降解单链RNA上的胞嘧啶（C）或尿嘧啶（U）残基。具体来说，切割识别的是由某核苷酸上的5’-核糖和相邻的嘧啶类核苷酸3’-核糖上磷酸基团形成的磷酸二酯键，从而使得2’, 3’-环磷酸水解为对应的3’-核苷磷酸（比如，pG-pG-pC-pA-pG经RNase A切割产生pG-pG-pCp 和A-PG）。RNase A切割单链RNA活性最高，推荐工作浓度为1-100μg/ml，兼容于各种反应体系。低盐浓度（0-100mM NaCl），可用来切割单链RNA，双链RNA，以及RNA-DNA杂交形成的RNA链。然而，高盐浓度（≥0.3M），RNase A仅特异性切割单链RNA。

核糖核酸酶A（RNase A）最常见的应用在于质粒DNA或基因组DNA制备过程中去除RNA，此制备过程中DNase酶活性的存在与否是需要重视的污染之一，可采用水浴煮沸这种传统方法来灭活DNase活性。另外，本品还可用于RNA酶保护分析、RNA序列分析等分子生物学实验。

核糖核酸酶A，来源于牛胰腺产品性质

运输和保存方法

冰袋运输。-20℃干燥保存，3年有效。

注意事项

1） 本品在生产过程中已经过相应方法去除DNase污染，对于常规质粒DNA或者基因组DNA抽提（不需要严格定量DNA水平）的应用，可不需要高温煮沸，直接配制母液即可。对于需要严格控制DNase酶残留的实验，建议高温煮沸或者购买DNase-free, protease-free的RNase A溶液（10mg/ml）(货号：10405ES03)。

2） RNase A会强吸附在玻璃器皿上，建议溶液装到塑料离心管内。

3） 对于同时操作完整RNA实验的研究人员，一定要谨防RNase A引入干扰试验结果的准确性。

4）   为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

核糖核酸酶A，来源于牛胰腺 储存液制备

注意：此为RNase A储存液配制的常用方法之一，也可以根据实验室传统的方法，或者参考文献资料使用其他方法制备储存液（如直接溶于10mM Tris-Cl, pH7.5；或者Tris-NaCl溶液）。

1） 利用10mM的醋酸钠（pH5.2）制备10mg/ml 的RNase A 储存液；

2）  00℃加热15min；

3） 冷却到室温，加入1/10体积的1M Tris-HCl（pH7.4），调其pH至7.4（例如，5ml 10mg/ml的RNase 储存液加入500μl 1M Tris-HCl, pH7.4）；

4） 分装于-20℃冻存，可稳定保存长达2年。

注意：在中性条件下煮沸RNase A溶液，会有RNase沉淀形成；在更低的pH下将其煮沸，如有沉淀可以观察到，可能由于蛋白杂质存在造成。煮沸之后若发现沉淀，可通过高速离心（13,000 rpm）去除杂质，然后分装冻存。