Beijing GENIA Biotechnology Co.,Ltd.

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Purchasermust determine the suitability of the product(s) for their particular use. Additional terms and conditions may apply.

Product Specification

Taq DNA 聚合酶

Taq DNA Polymerase

#SJ010/SJ050 500U/1000U

Store at -20℃

建议使用效期：1 YEAR

储存条件：

-20℃保存1 年。

单位定义：

用活性化的大马哈鱼精子DNA 作为模板/ 引物，在

74℃，30 分钟内，将10nmol 脱氧核苷酸掺入到酸性不

溶物质所需的酶量定义为1 个活性单位（U）。

浓度：5U/ul

产品描述：

Taq DNA Polymerase 是通过大肠杆菌表达纯化的重组

酶。其基因来源于Thermus aquaticus polymerase。

该蛋白分子量为94 kDa，具有5′→ 3′DNA 聚合酶活

性和5′→ 3′外切核酸酶活性，无3′→ 5′外切核酸酶

活性，扩增得到的PCR 产物3′端附有一个“A”碱基，因

此可直接用于T/A 克隆。本产品具有延伸速度快、扩增

效率高的特点，主要适用于PCR 法扩增DNA 片段、DNA

序列测定等实验。

应用举例：

以下举例为常规PCR 反应体系和反应条件，实际操作中

应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的

改进和优化。

质量控制：

经过多次柱纯化，SDS-PAGE 检测其纯度大于99%；

经检测无外源核酸酶活性；PCR 方法检测无宿主残余

DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温

存放一个月，无明显活性改变。

试剂 50μl 体系终浓度

10×Taq PCR Buffer 5μl 1×

dNTP Mix，2.5 mM each 4μl 200μM each

Forward Primer，10μM 2μl 0.4μM

Reverse Primer，10μM 2μl 0.4μM

Template DNA <1μg <1μg/reaction

Taq DNA Polymerase，5U/μl 0.25μl

RNase-Free Water up to 50μl

注意：

1）引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM 作为设定范围的参

考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生

非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。

2）镁离子浓度请以终浓度1.5-3mM 作为设定范围的参

考。本产品的10×PCR Buffer 中不含镁离子，单独配

有25mM MgCl2，可根据不同的引物对和模板来调节镁离

子浓度，由此优化反应体系。

1.PCR 反应体系

2.PCR 反应条件

步骤温度时间

预变性 94℃ 2min

变性 94℃ 30s

退火 55-65℃ 30s

延伸 72℃ 30s

终延伸 72℃ 2min

25-35 个循环

注意：

1）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm 低

5℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；

发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条

件。

2）延伸时间应根据所扩增片段大小设定，本产品Taq

DNA Polymerase 的扩增效率为1kb/30s。

3）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环

次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率

会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前

提下应尽量减少循环次数。

3. 结果检测：

反应结束后取5μl 反应产物，加入适量上样缓冲液后，

进行琼脂糖凝胶电泳检测。

组分说明

Cat.No. SJ010 SJ050

Kit Size 500U 1000U

Taq DNA Polymerase,5U/μl 100μl 200μl

10×Taq PCR Buffer 1×1.5ml 2×1.5ml

25mM MgCl2 1×1.5ml 2×1.5ml

注意：

本产品的10×Taq PCR Buffer 不含有镁离子，单

独配有25mM MgCl2。

相关产品：

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