Rosseta 感受态细胞 Rosetta(DE3) Chemically Competent Cell

产品规格: Rosetta(DE3) 10×100μl pUC19（control vector） 10pg/μl 10μl F -ompT hsdSB(rB -mB -)gal dcm(DE3) pRARE(argU，argW，ileX，glyT，leuW，proL)(CamR)High5TM系列 Rosetta(DE3) 感受态细胞具有氯霉素抗性，补充大肠杆菌缺乏的 6 种稀有密码 子(AUA，AGG， AGA， CUA，CCC， GGA) 对应的 tRNA，提高外源基因，尤其是真核基因在原核系 统中的表达水平，该菌株染色体整合了λ噬菌体 DE3 区（DE3 区含有 T7 噬菌体 RNA 聚合酶），同时 表达 T7 RNA 聚合酶和大肠杆菌 RNA 聚合酶，可用于 pET 系列，pGEX，pMAL 等质粒的蛋白表达。High5TM 系列 Rosetta(DE3) 感受态细胞由特殊工艺制作，经 pUC19 质粒检测转化效率高达 108cfu/μg。 1. 取 100μl 冰上融化的 Rosetta(DE3)感受态细胞，加入目的质粒并轻轻混匀，冰上静置 25 分钟。 2. 42℃水浴热激 45 秒，迅速放回冰上并静置 2 分钟，晃动会降低转化效率。3. 向离心管中加入 700μl 不含抗生素的无菌培养基（2YT 或 LB），混匀后 37℃，200rpm 复苏 60 分 钟。 4. 5000rpm 离心一分钟收菌，留取 100μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。 5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。