RNA 干扰（RNA interfering，RNAi）现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA(DsRNA)引发的基因转录后的沉默过程，小干扰RNA 特异性介导相同序列的mRNA 降解，阻断相应基因表达。为您提供的RAN 干扰技术包括化学合成小RNA 片段（SiRNA）和构建载体RNA（SnRNA）两种形式，客户只需提供干预基因名称或基因序列ID，我们免费设计合适的干预位点，保证至少有一对小RNA有效抑制目的基因表达，抑制效率不低于70%。

            （真核载体转染）                           （真核载体构建）           

服务内容：

 RNA 干扰流程

步骤一 确定干扰基因，设计并合成合适的小干扰RNA（片段型或载体型小干扰RNA）。

步骤二 预转染实验，进行细胞培养，摸索转染条件、时间并进行必要的检测（WB，PCR 等），确定干预效果最佳的一对小RNA。

步骤三 正式实验，设置合理实验分组，进行瞬时或稳定转染。

步骤四 转染后检测，根据实验要求选择细胞生物学检测、蛋白检测、分子生物学检测等。以研究小干扰RNA 对于细胞、蛋白或基因功能的影响。

 RNA 干扰检测

  细胞检测细胞增殖毒性MTT、 细胞凋亡细胞周期、 细胞迁移 细胞侵袭、蛋白检测免疫印迹 WB、 免疫细胞化学ICC 免疫荧光IF、流式细胞术FCM、 酶联免疫ELSIA、分子生物检测 RT-PCR 、实时荧光定量PCR、 甲基化特异性PCR(MSP)、生化检测酶类检测 脂类检测 糖类检测

收费标准：具体费用联系

服务周期：２月

结果提供：结果报告、代表性图片，合成报告、操作流程及相关试剂仪器信息。

样本提供需知：如干扰基因有确定的干扰片段/序列，按照以下流程进行

1-1）客户提供需要干预基因名称、ID 号、明确的干预序列

1-2）合成1 个针对目的基因的SiRNA（化学合成的干预片段）或SnRNA（以质粒构建的干

预载体，带荧光标签）

1-3）进行预实验，明确最佳的转染效率，选择一个干预RNA 进行正式实验

1-4）正式分组实验，进行转染以及收集细胞、开展下游检测（如WB、PCR、MTT、细胞侵袭实验、流式细胞术等）

如干扰基因无确定的干扰片段/序列，按照以下流程进行

2-1）客户提供需要干预基因名称、ID 号或者基因序列

2-2）合成1 套针对目的基因的SiRNA（化学合成干预片段）或SnRNA（以质粒构建的干预

载体，带荧光标签）

2-3）进行预实验，明确最佳的转染效率。

2-4）正式分组实验，进行转染以及收集细胞、开展下游检测（如WB、PCR、MTT、细胞

侵袭实验、流式细胞术等）

客户需知