热蛋白组分析TPP - PISA
产品名称: 热蛋白组分析TPP - PISA
英文名称: Proteome Integral Solubility Alteration
产品编号: 2
产品价格:
产品产地: 湖北武汉
品牌商标: null
更新时间: 2025-11-21T11:00:47
使用范围: null
| 规格 | 价格 |
| 样 | 1500.0 |
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- 邮箱 : proteome@spec-ally.com
PISA原理与实验流程
PISA的实验流程与TPP类似(F2),设置实验组与对照组,然后每组再细分成不同的温度处理组。与TPP不同的是,TPP分析需要检测实验组和对照组中每个温度处理组的蛋白质组定量结果,然后根据蛋白在实验组和对照组中不同温度点的定量水平绘制曲线,比较实验组和对照组蛋白定量曲线的偏移(ΔTm)来筛选靶蛋白。PISA分析则是分别将实验组和对照组各个温度处理组的样品混合起来定量检测,然后比较实验组和对照组蛋白的定量差异来筛选靶蛋白,这个时候实验组和对照组蛋白的定量差异反映到曲线上就是两条曲线在起始温度点间的面积(ΔSm)。因为PISA方法将不同温度处理的样品混合成了一组,所以只有实验组和对照组两组,算上三次重复实验进行统计学分析,仅需检测六组样品就可以实现目标。
谱度众合推出的TPP药物靶点筛选解决方案,包含以下几种实验方案:
经典流程TPP-TR(温度梯度蛋白热位移分析)
通过温度梯度(Temperature Range, TPP-TR)实验,构建蛋白热熔曲线,分析药物处理组与对照组间的蛋白热位移(ΔTm),筛选潜在药物作用靶点。
经典流程TPP-CCR(化合物浓度梯度蛋白热位移分析)
通过化合物浓度梯度(Compound Concentration Range, TPP-CCR)实验,构建蛋白热熔曲线,分析最高浓度药物处理样本与对照样本间发生显著稳定性变化的蛋白,筛选潜在药物作用靶点。
简化流程TPP-ITSA(等温位移分析)
通过等温位移分析(Isothermal Shift Assay, ITSA)实验,比较药物处理组与对照组在单温度刺激下的蛋白变性水平差异(热稳定性变化),筛选潜在药物作用靶点。
简化流程TPP-PISA(蛋白质组积分溶解度改变)
通过蛋白质组积分溶解度改变(Proteome Integral Solubility Alteration, PISA)实验,比较药物处理组与对照组在多个温度刺激下的混合样本的蛋白变性水平差异(热稳定性变化),筛选潜在药物作用靶点。

1.6-10个给药前样本(药物处理组与溶剂对照组各3-5个重复;如需增加不同浓度或者不同药物处理组,每组增加3-5个样本)。
2.实验组与对照组每组细胞总量建议>1*10^7(组织样本>5mg);药物用量:1μmol左右粉末或10μL药物母液(100×处理浓度)。
3.收集细胞/组织样本时需以PBS清洗干净,保留细胞沉淀/去浮水组织,样本不含有任何去垢剂/变性剂成分。
