T7 RNA聚合酶

产品及特点

本酶是噬菌体T7 DNA编码的酶，对T7启动子序列具有高度特异性，不能识别其它生物来源的启动子。本酶是依赖于DNA的RNA聚合酶，具有 5′→3′的RNA聚合酶活性，以含有T7启动子序列的双链DNA为模板，以NTP为底物，合成与启动子下游的单链DNA互补的RNA。

1. 为 Northern杂交以及Southern杂交制作高标记探针。

2. 制作 RNA 剪接反应（RNA Splicing）的前体。

3. 以帽类似物（Cap analog）为引物，制作Capped mRNA。

质量标准

无endodeoxyribonucleases，exodeoxyribonucleases，phosphatasesand ribonucleases污染。SDS-PAGE下呈单一带，纯度>99%。

活性单位定义

1个活性单位是指在37℃、60分钟内将1nmol的AMP合成掺入到寡聚核苷酸片段(DE-81光吸收形式)所需的酶量。酶活性检测反应混合物：40mM Tris-HCl(pH8.0)，6mM MgCl2，10mM DTT，2mM亚精胺，0.5mM各种NTP，0.6MBq/ml[3H］-ATP和20μg/ml含有相应启动子的序列的质粒DNA。

Buffer成分

储存Buffer:50mM Tris-HCl (pH8.0)，150mM NaCl，5mM DTT，0.1mg/ml BSA，0.5mM ELUGENT 去污剂和50%（v/v）甘油。反应Buffer，5×：200mM Tris-HCl (pH7.9 at 25℃)，30mM MgCl2，50mM DTT，50mM NaCl和10mM亚精胺。