单宁含量测定试剂盒 微量法-常用生化试剂-试剂-生物在线
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单宁含量测定试剂盒 微量法

单宁含量测定试剂盒 微量法

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产品名称: 单宁含量测定试剂盒 微量法

英文名称: Micro Tannic Acid Content Assay Kit

产品编号: BC1395

产品价格: 0

产品产地: 北京市通州区马驹桥联东U谷85A三

品牌商标: Solarbio

更新时间: 2024-11-01T11:07:29

使用范围: null

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产品说明: 

单宁是一类广泛存在于植物体内的多元酚化合物,又称植物多酚。具有独特的化学性质和多种 生理活性,如能与蛋白质、生物碱、多糖结合;能与多种金属离子发生络合或静电作用;具有止血、 抑制微生物、抗过敏、抗突变、抗肿瘤、抗衰老等生理活性。 单宁在碱性环境下与磷钼酸反应,生成蓝色化合物,在760nm 处有最大吸收峰。

需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵和蒸馏水。

 

操作步骤: 

一、 单宁的提取:

按照组织质量(g):蒸馏水体积(mL)为1:5~10 的比例(建议称取约0.1g 组织,加入1mL蒸 馏水),充分匀浆后转移到EP 管中,80℃水浴提取30min,8000 g,25℃离心10 min,取上清液待 测。

二、 测定步骤: 

1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至760nm,蒸馏水调零;试剂一和试剂二37℃预热10min 以上。

2、 操作表:

试剂名称(μL)

对照管

测定管

样本

 

15

蒸馏水

665

650

试剂一

175

175

混匀,室温静置 5min

试剂二

160

160

混匀,室温静置30min,760nm 处读取吸光值A,ΔA=A 测定-A 对照,对照管只要做一管。

三、 单宁含量计算: 

1、 标准条件下测定的回归方程为y = 0.008x - 0.0021;x 为标准品浓度(μg/mL),y 为吸光值。

2、 按样本鲜重计算:

单宁含量(μg /g 鲜重)= [(ΔA+0.0021) ÷0.008×V1]÷(W×V1÷V2)=125×(ΔA+0.0021) ÷W。 3、按样本蛋白浓度计算:

单宁含量(μg /mg prot)= [(ΔA+0.0021) ÷0.008×V1]÷(V1×Cpr)=125×(ΔA+0.0021) ÷Cpr。 V1:加入样本体积,0.015mL;V2:加入提取液体积,1mL; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL; W:样本鲜重,g。

注意:最低检测限为 10μg /g 鲜重 或 0. 1μg /mg prot