microRNA简介
        microRNA（miRNA）是一类内生的、长度约20-24个核苷酸的小RNA,是发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成。其在细胞内具有多种重要的调节作用。每个miRNA可以有多个靶基因，而几个miRNAs也可以调节同一个基因。这种复杂的调节网络既可以通过一个miRNA来调控多个基因的表达，也可以通过几个miRNAs的组合来精细调控某个基因的表达。随着miRNA调控基因表达的研究的逐步深入，将帮助我们理解高等真核生物的基因榈母有院透丛拥幕虮泶锏骺赝?
      叶民生物为您提供microRNA载体构建技术服务，您只需提供您要做的目的基因序列及ID号，本公司专业的技术人员为您完成microRNA靶位点序列设计分析、及microRNA载体构建；

microRNA载体构建的特点及优点： 
      1. 超过70成功阻断：利用BLOCK-It RNAi Designer设计软件，可快速高效地设计、克隆出双链寡核苷酸序列，构建出含Pol II启动子启动的用于RNAi分析的载体，用于RNAi分析，100保证提供不少于70的有效阻断（当以50nM转染，而且转染效率至少达80时，一套中3条RNAi中至少有2条达到至少70转录的阻断）； 
      2. 简单的表达跟踪：可通过同-顺反子表达Emerald Green Fluorescent Protein(EmGFP)和目的microRNA (miRNA)使得分析简单以及报告因子活性与阻断之间可靠的相关性 
      3. 多靶标阻断：同-顺反子（Co-cistronic）表达使得多个靶标同时阻断并且产生综合表现型。 
      4. 组织特异实验选择：通过选择广泛的目的载体或者Multisite Gateway应用，你可以加入你选择的启动子进行细胞内应用或者体内阻断，在哺乳动物细胞中可进行瞬时或永久的microRNA表达； 

microRNA载体构建技术服务流程：
       1.microRNA靶点的预测
         利用软件得到的目的microRNA的预测靶点。
       2.获得microRNA对应DNA模板
         根据提供的靶序列，合成两条互补的单链DNA模板。或者，设计引物PCR扩增microRNA靶基因3’UTR序列。
       3.microRNA靶序列克隆
          将合成的两条单链退火成双链（具有粘性末端），或将PCR产物双酶切，后连入经过同样双酶切的miR-reporter载体中，连接产物转化大肠杆菌。
       4.阳性克隆鉴定。
          挑选转化的菌落，PCR筛选含有插入片段的阳性克隆，测序验证克隆的序列和目的microRNA靶序列一致。
        5.准备质粒，菌株
         抽提验证正确的质粒，定量。准备含有正确质粒的单克隆甘油菌株。
        6.产品包装，发货
         提供有microRNA靶序列的报告质粒，并免费提供阴性对照一份。甘油保存菌株各一支。