AfeI-核酸/蛋白合成-试剂-生物在线
上海沪震实业有限公司
AfeI

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产品名称： AfeI

英文名称： AfeI

产品编号： HZ600324

产品价格： 0

产品产地： 中国/上海

品牌商标： HZbscience

更新时间： 2023-08-17T10:24:20

使用范围： null

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 AfeI

附带条件

附带条件

在16小时内完全消化1μg底物DNA的最小单位数为0, 25。AFEI以大致相等的速率切割超螺旋和线性质粒DNA（PBR322）。AFEI以比质粒DNA高3-4倍的速率裂解λDNA/BAMHI消化。

附带条件

酶的一个单位是在37℃的1小时内，在50μL的总反应体积中水解1μgλDNA（BAMHI消化液）所需的量。

识别位点AGC GCT

从粪产碱杆菌T27 74携带克隆AFEⅠ基因的源E.coli株

λDNA检测（BAMHI文摘）

最佳缓冲液Y（33毫米醋酸三乙酯（pH为7.9，在25°C）；10毫米醋酸镁；66毫米醋酸钾；1毫米DTT）。

最佳温度37°C

贮藏条件为10 mM TrI HCl（pH 7.6）；50 mM NaCl；0.1 mm EDTA；1 mm DTT；200μg/ml牛血清白蛋白；50%甘油；储存在-20℃。

80%倍以上的DNA PBR322片段经10倍过量消化后结扎可结扎和再剪接。

非特异性水溶性片段可结扎和剪接。在37°C孵育1μg DNA后，用40μA酶孵育16小时，检测非特异性Hyrasistes无非特异性的活性。

甲基化敏感性未经测试的甲基化效应

在65℃下孵育20分钟，使失活酶失活。

 

主动脉端动脉高压

产品描述

使用说明

 

The minimum number of units that resulted in complete digestion of 1 μg of substrate DNA in 16 hours is 0, 25. AfeI cleaves supercoiled and linear plasmid DNA (pBR322) at a roughly equal rate. AfeI cleaves Lambda DNA/BamHI digest at a rate 3-4 times higher than plasmid DNA.

技术规格

 

 

Unit definition One unit of the enzyme is the amount required to hydrolyze 1 μg of Lambda DNA (BamHI-digest) in 1 hour at 37°C in a total reaction volume of 50 μl.
Recognition sites AGC↑GCT
Source E.coli strain that carries the cloned Afe I gene from Alcaligenes faecalis T2774
Assayed on Lambda DNA (BamHI-digest)
Optimal buffer Y (33 mM Tris-acetate (pH 7.9 at 25°C); 10 mM magnesium acetate; 66 mM potassium acetate; 1 mM DTT.)
Optimal temperature 37°C
Storage conditions 10 mM Tris-HCl (pH 7.6); 50 mM NaCl; 0.1 mM EDTA; 1 mM DTT; 200 μg/ml BSA; 50% glycerol; Store at -20°C.
Ligations After 10-fold overdigestion with enzyme more than 80% of DNA pBR322 fragments can be ligated and recut.
Non-specific hydrolisis fragments can be ligated and recut.|Non-specific hydrolisis No nonspecific activity was detected after incubation of 1 μg of DNA with 40 u.a. of enzyme for 16 hours at 37°C.
Methlation effect Methylation sensitivity not tested
Thermal inactivation enzyme is inactivated by incubation at 65°C for 20 mins.
Campatible Ends Aor51HI , Eco47III, FunI