植物线粒体蛋白提取试剂盒

中文名称：植物线粒体蛋白提取试剂盒
英文名称：Plant mitochondrial protein extraction kit
产品规格：50T|100T
线粒体(mitochondria)是真核细胞中产生能量的重要细胞器。细胞中的能源物质-脂肪、糖、部分氨基酸在此进行最终的氧化，并通过偶联磷酸化生成ATP，供给细胞生理活动之需。
对线粒体结构与功能的研究通常是在离体的线粒体上进行的，本试剂盒用简便快速的方法即可在1小时内提取得到线粒体蛋白。

储存条件：2-8℃保存。
有效期：一年。

注意事项：
●本试剂盒仅供科学研究使用，不可用于诊断或治疗。
● 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，避免开盖时试剂损失。
● 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。
● 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并彻底清除残留清洁剂。
● 避免皮肤或粘膜与试剂接触。

试剂盒以外自备试剂和仪器：
● 移液器、吸头 ●离心机及离心管
● 涡旋振荡器 ●冰箱，冰盒

使用方法：

使用注意事项：
● 旋帽离心管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖内壁上的液体甩至管底，避免开盖时液体洒落。
● 实验过程中的所有试剂须预冷；所有器具须放-20℃冰箱预冷。整个过程须保持样品处于低温。

1．取洗净擦干后并去除叶梗和粗脉的1g植物组织样本剪碎①，采用以下一种方法处理：
I．加入3ml提取液后用匀浆机/Dounce匀浆器匀浆。
II．置于研钵中用液氮研磨，研磨后加入3ml冷的提取液。
III．加入3ml提取液直接置冰上研磨。
2．将匀浆用250目细胞筛或3 层纱布或脱脂棉过滤。或者在4℃，100×g力条件下离心1分钟，收集上清，弃沉淀。
3．将滤液700g离心10分钟，取上清。
4．将上清11000g离心20分钟。
5．弃上清，留沉淀。
6．每200μl蛋白提取液B中加入1μl蛋白酶抑制剂混合物混匀。用200-400μl蛋白提取液B重悬沉淀，在4℃条件下振荡20分钟，至无明显沉淀。
7．在4℃，14000g条件下离心15分钟。
8．快速将上清吸入另一预冷的干净离心管，即可得到线粒体蛋白。
9．将上述蛋白提取物定量②后分装于-80℃冰箱保存备用或直接用于下游实验③。
注：
①培养细胞直接收集细胞后用Dounce匀浆器匀浆即可，匀浆后直接进行第3 步离心。
② 建议用BCA 法进行蛋白定量。
③蛋白样品－80℃存放一年没有问题。注意不要被蛋白酶水解掉，不要被细菌污染。 

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！