天津百伦斯生物技术有限公司
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Lysis Butter 裂解缓冲液 |
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| Lysis Buffer是生物学实验中经常使用的缓冲液,它是一个很大很宽泛的概念,它并不特指某种固定的溶液配方,而是要根据不同的实验目的有针对性的选择和调整。比如提供质粒、RNA、纯化蛋白、分离细胞器等,需要用到不同配方的Lysis Buffer。另外,不同的细胞类型,如动物细胞、真菌细胞或细菌细胞,裂解时所用的Lysis Buffer也各自不同,甚至上面这三大类细胞类型中都还可以细分成多种性质不同的小类。如细菌细胞中革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌由于细胞壁结构不同,裂解时也要考虑不同结构的Lysis Buffer。所以在采购Lysis Buffer产品时,一定要进行选择。Lysis Buffer也有它的共性,如缓冲能力、破坏细胞壁、细胞膜的裂解能力等。 裂解都用到缓冲剂,只要在缓冲溶液pH范围内,BPS、Tris都可以作为缓冲剂,氯化钠的浓度直接影响到蛋白与蛋白之间的相互作用,一般浓度在0-1M之间。一般而言,氯化钠浓度越高,越不利于蛋白之间结合。EDTA浓度一般在0-5mM,也是缓冲剂的主要成分,也是酶活性抑止剂,量大可使酶失活保护蛋白。表面活性剂是非常值得关注的,离子性表面活性剂的裂解效果最强,两性非离子性表面活性剂裂解效果次之。一般离子性表面活性剂的用量在0.01%-0.05%之间,两性表面活性剂用量在0-10mM之间,非离子性表面活性剂用量在0.1%-0.2%之间。在裂解液中常用到表面活性剂有Tritonx-100、NP-40、脱氧胆酸钠、肌氨酸钠、SDS、CTAB等。 裂解液中还有一个很重要的成分——蛋白酶抑止剂,其作用是阻止蛋白酶对细胞组织的消化作用,使组织细胞受到完全的保护。不同的蛋白酶需要不同的抑止剂,对其选择相当重要,只有正确选择,才能有效抑止蛋白的降解,使其维持原有的蛋白相互作用。 常用的蛋白酶抑止剂有多聚磷酸钠,钒酸钠、PMSF、DTT、巯基乙醇、Pepstatin(胃蛋白酶抑止剂)、Lenpeptin(亮抑止肽)、Aprotinin(抑蛋白酶肽)等。有些抑止剂稳定性很差,一般不放入裂解储存液中,在裂解前临时加入。 RIPA Lysis Buffer是一种传统的动物组织细胞快速裂解液,全称为Radio Immuno Precipitation Assay(RIPA) Lysis Buffer。经RIPA Lysis Buffer裂解液裂解得到的蛋白可以用于常规的Western、IP等，RIPA裂解液的配方有很多,根据其裂解的强度大致可以分为强、中、弱三类。 |
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| 名称 | 用途 | 包装 | 储存 | 备注 | ||
| RIPA Lysis Buffer Solution (Strong) RIPA裂解缓冲液(强) |
WB、IP | 100ml | 4℃灭菌 | 传统组织细胞快速裂解液 | ||
| RIPA Lysis Buffer Solution (Medium) RIPA裂解缓冲液(中) |
WB、IP | 100ml | 4℃灭菌 | |||
| RIPA Lysis Buffer Solution(Weak) RIPA裂解缓冲液(弱) |
WB、IP | 100ml | 4℃灭菌 | |||
| Western IP Cell Lysis Buffer Solution Western及IP细胞裂解缓冲液 |
WB、IP、CO-Ip | 100ml | 4℃灭菌 | 是非变性条件F细胞裂解溶液，其蛋白酶抑止剂另备，便于保存 | ||
| NP-40 Lysis Buffer Solution NP-40 裂解缓冲液 |
WB、IP CO-IP | 100ml | 4℃灭菌 | 是一种比较温和的细胞组织裂解液 | ||
| 500ml | 4℃灭菌 | |||||
| 2×NP-40 Lysis Buffer Solution 含有NP-40裂解缓冲液(2×) |
WB、IP CO-IP | 100ml | 4℃灭菌 | |||
| 500ml | 4℃灭菌 | |||||
| SDS Lysis Buffer Solution 含有SDS裂解缓冲液 |
WB、IP、CO-Ip | 100ml | 4℃灭菌 | 是一种比较强烈的细胞组织裂解液 | ||
| 2×CTAB Lysis Buffer Solution 含CTAB的裂解缓冲液(2×) |
DNA | 100ml | 4℃灭菌 | 含有NaF、NaVO3、EDTA抑止剂，但Lenpeptin另备 | ||
| Bacterial Lysis Buffer Solution 细菌细胞裂解缓冲液 |
细菌天然蛋白和重组蛋白 | 100ml | ||||
| RBC Lysis Buffer Solution 红细胞裂解缓冲液 |
人外周血及小鼠造血组织的单细胞红细胞 | 100ml | 4℃灭菌 | |||
| 200ml | ||||||
| 10×RBC Lysis Buffer Solution (Multispecies) 10×红细胞裂解液(多物种) | 多物种的外周血单细胞及造血组织中的红细胞 | 50ml | 4℃灭菌 | |||
| 100ml | ||||||
| Hypotionic Lysis Buffer Solution 低渗裂解缓冲液 |
100ml | |||||
| TissueTotal Protein Lysis Buffer Solution(ATL) 组织总蛋白裂解液 |
动物组织蛋白质的变性提取 | 100ml | 2-8℃灭菌 | |||
| Mammalian Cell Lysis Buffer Solution 哺乳动物细胞裂解液 |
100ml | |||||
| Urea Lysis Buffer Solution 含尿素裂解液 |
蛋白测定，细菌RNA提取 | 100ml | 4℃保存 | |||
| Alkaline Lysis SolutionⅠ 碱性裂解液Ⅰ | DNA分离 | 100ml | ||||
| Alkaline Lysis SolutionⅡ 碱性裂解液Ⅱ | DNA分离 | 100ml | ||||
| Alkaline Lysis SolutionⅢ 碱性裂解液Ⅲ | DNA分离 | 100ml | ||||