DNA损伤/DNA断裂/遗传毒性/SCGE/彗星试验/单细胞凝胶电泳检测服务

本公司的彗星试验世界一流，国际领先，国内最好。1．本公司拥有彗星试验的三项专利：脱细胞DNA检测新技术-脱细胞彗星实验，单细胞凝胶试验专用电泳槽和彗星图象全自动分析软件。均属于世界首创，处于国际领先水平。2.批量电泳：一次最多可对数十个样品同时进行电泳，保证了样品电泳条件的一致性。排除了电泳条件对不同样品的影响，有利于阴性对照和/或阳性对照与研究的试验对象进行比较。可以对个体的遗传物质损伤情况提供充分信息。3. 严格的标准操作规范和完善配套的仪器设备，为更好地完成彗星试验提供了软硬件保障。4.经验丰富的研究员为您提供免费技术咨询。结果：提供彗星试验电泳载玻片，所有已经分析的图像，数据分析结果及统计结果。结果参数包括：彗星长；彗星光密度；彗星重心；尾长；尾光密度；尾重心；Olive 尾矩；尾%DNA；头长；头%DNA；头光密度；头重心；头惯量；头分布矩；尾/头(长)

    收费标准：全程服务（为保证结果客观、科学、经得起验证，不提供单项服务）铺片-裂解-解旋-电泳-干片-染色-荧光显微镜荧光激发-ccd成像-专用分析软件分析-数据统计分析结果  十个样品以内：2000元；十个样品以上的部分，按每增加一个样品，加收100元。2. 图像分析：溴化乙啶染色-荧光显微镜荧光激发-ccd成像-专用分析软件分析-数据统计分析结果  十个样品以下：500元；10个样品以上，每增加一个样品，加收20元

彗星试验相关产品是北京博乐康科技有限公司的核心产品之一。本公司由美国名牌大学的华人博士创办，是中关村高新技术企业，时刻以开拓、创新和发展为使命，秉持做世界名牌企业展现华人企业风采的理念，形成了“中国人制造+中国人创造”的核心竞争力。

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彗星试验的应用

1遗传毒性试验 彗星试验是一系列评定新药和其它化学物安全性的标准试验。被广泛用于体外实验；组织和白细胞可以被分解为单细胞悬液，提供了实验材料。通常我们用形式简单的彗星试验来检测DNA断裂，增高的敏感性以及作用机制的附加信息由于用内切酶来测定特定类型的损害而增加。同样也可在细胞培养系统评价遗传毒性，可单纯用这一系统或者与可为化学物代谢为活性形式提供酶类的肝微粒体‘S9’片段的结合来检测。另一方面是其化学保护作用的研究：例如彗星试验特别适合于植物化学物保护细胞免受遗传毒性刺激的研究。

2生态学监测 合适的生物可以和彗星试验联合，作为有遗传毒物污染环境的生物传感器。这项工作还处于初级阶段，但已有海生物如贻贝、甚至蚯蚓和鼠的相关报道。

3人类研究 彗星试验完美地适合人类研究，因它不需要放射性标记，或其它有害的操作，并可被用于易获得的细胞（正常白细胞）。

3.1 生物监测 应用包括遗传毒性物质或射线职业暴露的监测；与各种人类疾病有关的氧化应激的评定；和吸烟有关的DNA损伤的检测。一般情况下，尽管可在暴露组和对照组发现显著差异，但每组的损伤水平都有大的个体差异，如同饮食、应激和感染引起的个体差异，所以，试图用彗星试验结果来分析某些疾病如癌症的个体危险度是不成熟的，也是不合理的。

3.2 营养研究 彗星试验是在人类DNA损伤水平研究营养素/微营养素效用的完美方法。饮食中脂类含量的不同导致淋巴细胞中DNA氧化损伤的改变——多不饱和脂肪酸能使其增加。另一方面，体内供应抗氧化物或富抗氧化物食物的保护效应，很容易在淋巴细胞中被记录，表现为内源性碱基氧化的减少或对体外过氧化氢诱导损伤敏感性的降低。

3.3 诊断 一些病例可以用彗星试验作为辅助诊断方法。Nijmegen断裂综合征是和遗传不稳定性和肿瘤易患性有关的常染色体隐性疾病。可以通过淋巴细胞彗星中异常高的断链水平来识别其杂合子。

3.4  评定背景损伤水平 DNA碱基氧化损伤是癌症的一个可能病因，然而我们并不能得知存在的损伤量的多少。人类DNA中8-羟基鸟嘌呤含量的测定相差3-4个数量级。GC-MS 和HPLC+电化学检测提供的高数值受样品准备过程中鸟嘌呤氧化的一系列假象的影响：限制氧化的可能性使测定值下降。彗星试验和FPG用于定量结果表明每106鸟嘌呤出现8-羟基鸟嘌呤的频率约为0.5，低于HPLC测定的最低水平几倍。

4  DNA修复检测 奇怪的是，我们对个体间DNA修复能力的差异知之甚少，尽管它是个体肿瘤易感性的重要决定因素。迄今为止，还没有一个合适的，敏感的方法可被运用，但彗星试验将填补这一空缺。1 细胞修复 理论上讲，检测修复能力的可靠方法是刺激细胞使DNA损伤，然后检测其损伤消除的速度。因此，可用电离辐射或过氧化氢处理淋巴细胞，然后重接断裂；或用碱基损伤剂处理后培养，在凝胶上用合适的核酸内切酶可检测存在的损伤。我们发现淋巴细胞用过氧化氢处理后断裂重接的速度很慢。并且血液新鲜分离细胞急性暴露于大气氧时会导致大量的额外损伤，这将严重的影响分析结果。2 体外修复检测 与传统的酶联彗星试验相反，细胞提取物的修复活性作为一种替代方法，可用于体外检测。细胞用任何一种合适的损伤剂处理以检测损伤，例如，用UV辐射或光敏剂加可见光诱导碱基氧化，由细胞如淋巴细胞制备简单的细胞提取物可通过以下步骤：冷冻、解冻、加Triton X-100以及离心去除细胞残屑，以凝胶包埋类核的形式准备损伤DNA底物，然后把底物与提取物混合，断裂积聚的速度表明提取物切除损伤点的能力。 5 彗星试验在人群研究和动物试验中运用的使用性研究 彗星试验非常适合于分子流行病学和动物试验中的应用，但必须考虑到它的可靠性,使其达到真正的定量。

5.1 研究设计 人群研究要根据标准的流行病学研究来设计。为确定研究群体的大小要求进行计算。必须进行试验性研究以估计个体间或个体内所测损伤类型变异的范围。

5.2 彗星试验的标准化 分析时应包括标准，例如，从不同个体中收集的淋巴细胞可被集中、分份冻结，需要时再溶解。标准应每次都给出相似的损伤测量值，有偏差则警示检测的某些方面发生改变。

5.3 淋巴细胞的储存 试验所用的淋巴细胞样品可在液氮中冻结保存数月。但是，细胞必须悬浮在介质中以保持生存率（对人淋巴细胞，要求90%胎牛血清/10%DMSO），必须缓慢冷冻——小于或等于1℃/分钟；将装有细胞悬液的小瓶放如泡沫聚苯乙烯盒，-80℃冰箱过夜，然后投入液氮长期保存。

5.4 细胞生存率检测 不管是新鲜细胞还是复苏细胞，细胞的完整性可通过台盼蓝染色来检测，应大于90%，过高的损伤背景和差的细胞质量有关；但我们也见过，即使有50%的细胞出现膜损伤，也可发现可接受的低的损伤背景水平。

5.5 电泳后凝胶的储存 彗星试验后马上给玻片打分是做不到的，如果在普通玻璃而不是磨沙玻璃上准备凝胶，它们就可被风干并无限期保存。干的凝胶比新鲜凝胶容易打分，因为所有的彗星都在同一水平面，不需不停的重调焦距。

5.6 统计分析 可在不同水平进行。例如，凝胶可根据不同彗星记录的损伤水平进行分析，也可根据它们的分布方式进行分析。或者，我们可致力于对同一样品重复测定的CV值的分析。但当我们分析人类或动物实验中组间差异或处理效应的时候，我们感兴趣的是每一个体的彗星记分的全面意义。

5.7 饱和度测定 DNA断裂频率与尾部DNA百分含量线性相关——直到一定水平。当所有的DNA都在尾部时，就是发生了明显的饱和，损伤接近这一水平时，线形相关就会发生偏移。需要特别注意的的是，当断链水平已经很高时再发生特异损伤核酸内切酶位点的暴露，会有低估碱基损伤的倾向。