2× SYBR Mixture
产品名称: 2× SYBR Mixture
英文名称: Wehelp 2× SYBR Mixture
产品编号: Molebio-004
产品价格: 0
产品产地: 中国
品牌商标: wehelp
更新时间: null
使用范围: null
- 联系人 :
- 地址 : 江苏省泰州医药高新区药城四期G75栋2层
- 邮编 : 225300
- 所在区域 : 江苏
- 电话 : 151****6128 点击查看
- 传真 : 点击查看
- 邮箱 : sales@wehelpinc.com
Wehelp (Golden)SYBR Mixture是专用于染料法(SYBR Green Ӏ)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含(Golden)Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs、SYBR Green Ӏ荧光染料和Mg2+。配制好的预混合液操作简单便捷、能有效缩短操作时间,减少移液过程中混入的污染。
SYBR Green Ӏ是一种结合于dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的荧光染料SYBR Green Ӏ与dsDNA 结合荧光信号会增800-1000倍,是一种常用的qPCR荧光染料。该染料性价比高、操作简便,具有高灵敏度、信噪比高等优势,可应用于基因表达差异分析,基因芯片等。
Molebio-004中使用了全新高效的Taq DNA Polymerase与Wehelp独特配制的PCR缓冲体系,Taq DNA Polymerase具有5’-3’聚合酶活性和3’-5’外切酶活性,PCR反应灵敏度高、特异性强。
优点
Ø 配制好的预混合液中只需加入模板、 引物、灭菌水便可进行 Real Time PCR 反应,操作简单方便。
Ø 适用于荧光定量PCR检测,能够准确地对目的基因进行定量和检测。
Ø SYBR Green Ӏ 染料经济实惠,使用方便,灵敏度高、信噪比强。
注意事项
Ø -20℃避光保存,防止污染。
Ø 使用前,将产品室温下解冻,并轻轻涡旋混匀,解冻后所有实验应在冰上操作。
Ø 避免反复冻融,反复冻融可能使产品性能下降。
Ø 在荧光定量PCR仪上进行实时PCR,并在退火或延伸步骤记录荧光信号。
Ø 本产品未添加ROX校正染料。
Ø 本产品不能用于探针法荧光定量PCR。
使用指导
1、PCR反应体系
试剂 |
50 μl 反应体系 |
终浓度 |
2× SYBR Mixture |
25 μl |
1× |
10 μM Forward Primer |
1 μl |
0.2 μM (0.05-1 μM) |
10 μM Reverse Primer |
1 μl |
0.2 μM (0.05-1 μM) |
Template DNA |
2 μl |
|
ddH2O |
to 50 μl |
|
2、PCR循环反应条件
步骤 |
循环次数 |
温度 |
时间 |
1 |
1 |
96℃ |
2分 |
2 |
35~40 |
95℃ |
15 秒 |
60~64℃ (信号采集点) |
1分 |
||
3 |
1 (熔解曲线) |
95℃ |
15秒 |
60℃ |
1分 |
||
95℃ |
15秒 |
||
60℃ |
15秒 |
反应条件优化
u 引物浓度:一般以引物浓度0.2 μM为最佳浓度,终浓度0.05-1.0 μM为参考范围。降低引物浓度提高反应特异性;增加引物的浓度提高扩增效率,优化反应体系。
u 退火温度:升高退火温度是常用的提高反应特异性的方法,