山羊促甲状腺素ELISA北京检测/山羊TSHELISA血清代测
产品名称: 山羊促甲状腺素ELISA北京检测/山羊TSHELISA血清代测
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elisa 小知识:
辣根过氧化物酶(HRP)是一种糖蛋白,每个分子含有一个氯化血红素(protonhemin)区作辅基。酶的浓度和纯度常以辅基的含量表示。氯化血红素辅基的最大吸收峰是403nm,HRP酶蛋白的最大吸收峰是275nm,所以酶的浓度和纯度计算式是(已知HRP的A(1cm 403nm 1%)=25,式中1%指HRP百分浓度为100ml含酶蛋白1g,即10mg/ml,所以,酶浓度以 mg/ml 计算是HRP的A(1cm 403nm mg/ml=2.5)HRP纯度(RZ)=A403nm/A275nm纯度RZ(Reinheit Zahl)值越大说明酶内所含杂质越少。高纯度HRP的RZ值在3.0左右,最高可达3.4。用于ELISA检测的HRP的RZ值要求在3.0以上。
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ELISA小常识:ELISA试验条件固相载体的选择:载体的种类比较多,其中包括纤维素、交联右旋糖酐、葡萄球菌聚苯乙烯、聚丙烯酰胺等。从使用形式上可有凹孔平板、试管、珠粒等。聚苯乙烯凹孔板是应用最广泛的一种载体。聚苯乙烯塑料微量滴定板吸附蛋白的性能好,操作简便、用量小,适于大批检查。由于聚苯乙烯的工艺过程不是很稳定,造成各批次差异比较大。所以进行ELISA之前,必须进行筛选。检查方法:⑴ 吸附性能的检查:先加抗体包被,然后加入同一稀释度的酶标抗体,最后加底物、显色、测OD值,求出总平均OD值,再求出每相邻两孔的OD平均值,此均值在总均值的±10%以内为合格,若中间孔与四周孔OD值相差太大,或一侧与另一侧孔OD值相差较大均属不合格。⑵ 对比测定阳性血清与阴性血清,观察是否存在明显差异,若二者OD值相差于10倍以上者为合格。板的处理。新板一般不用处理,用蒸馏水冲洗即可应用。板用一次即废。但不少实验工作者认为用超声波处理,清洁液Tritonx100、20%乙二醇处理仍可应用。但发现空白对照显色较深和阳性样品显色结果不理想时,应放弃不用。