SiRNA/ShRNA基因干扰：

RNA干扰（RNA interfering，RNAi）现象是指由与靶基因序列同源的双链RNA(DsRNA)引发的基因转录后的沉默过程，小干扰RNA特异性介导相同序列的mRNA降解，阻断相应基因表达。

开阳生物为您提供的RAN干扰技术包括化学合成小RNA片段（SiRNA）和构建载体RNA（SnRNA）两种形式，客户只需提供干预基因名称或基因序列ID，我们免费设计合适的干预位点，保证至少有一对小RNA有效抑制目的基因表达，抑制效率不低于70%。

RNA干扰流程：

1） 确定干扰基因，设计并合成合适的小干扰RNA（片段型或载体型小干扰RNA），根据目的mRNA序列，设计3 条RNA干扰靶序列以及1条阴性对照，靶序列一般为19－21nt长；对于每条选定的siRNA靶序列，设计siRNA正义链和反义链，以loop（9nt）相连，称为shRNA（short hairpin RNA）。

注：载体型小干扰RNA可以选择真核质粒载体和病毒载体两种构建方式。一般而言，在保证干预效果的前提下，如果不是必须做稳定转染，考虑首选真核质粒载构建体SnRNA，该构建费用较且一般3周内构建好，较病毒型SnRNA费用低且时间短。

2）预转染实验，进行细胞培养，摸索转染条件、时间并进行必要的检测（WB，PCR等），确定干预效果最佳的一对小RNA用于正式实验。

3）正式实验，设置合理实验分组，进行瞬时或稳定转染。

4）转染后检测，根据实验要求选择细胞学检测、蛋白检测、流式检测、基因检测等

通过相关检测可以研究小干扰RNA对于细胞、蛋白或基因功能的影响。

RNA干扰后可做的各项检测：

细胞检测（细胞增殖毒性MTT、细胞凋亡、细胞周期、细胞迁移与侵袭等）

蛋白检测（免疫印迹WB、免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、ELISA）

分子生物检测（RT-PCR、荧光定量PCR、甲基化特异性PCR、基因芯片）

生化因子检测、酶类检测、流式细胞术FCM等

RNA干扰真核载体转染（白光）                RNA干扰真核载体转染（荧光）