| 产品介绍

第二代HyCyteTM基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)是基于海星生物的位点特异性SSR重组酶技术开发的基因干扰稳转试剂盒。

产品特点：利用SSR (Site-specific Recombinase)重组酶实现干扰序列载体高效稳转，大幅提升了干扰效率。试剂盒的转染操作与siRNA转染操作一样，构建与病毒一样的基因干扰稳转细胞株，是新一代的基因干扰技术产品。

干扰试剂盒包括了人(Human)和小鼠(Mouse)基因组的所有基因，shRNAx2.0试剂盒包含2个优选的shRNA干扰序列载体、1个表达GFP/对照shRNA干扰序列载体和1管位点特异性SSR重组酶，通过SSR重组酶高效催化shRNA载体整合到细胞的基因组中，实现shRN**段的细胞稳转效果；同时由于SSR重组酶整合效率极高，shRN**段在目的细胞基因组大约含有10~100个拷贝，高拷贝数大幅提升了shRN**段的表达效果，从而提升了基因的干扰效果。shRNAx2.0载体包含有puro抗性基因和GFP荧光基因，可以轻松通过荧光判断干扰载体的转染效率和目的载体表达效率，并通过Puromycin药物筛选，获得高表达的细胞株，轻松建立基因干扰稳转细胞株。shRNAx2.0干扰稳转试剂盒的操作与siRNA转染过程一样简单，对各种细胞都有非常好的干扰效果，也适用于间充质干细胞（MSCs）等的基因功能研究。

| 产品优势特点

比病毒法更简单——对分裂细胞和非分裂细胞都有非常好的干扰效果

细胞稳转效率高——仅需1~2周便可以拿到长期稳定干扰的细胞株

| 产品构成

| 产品原理

HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)的干扰效率与传统病毒法干扰效率相当。因其独有SSR重组酶可以构建高拷贝“稳转”细胞株，同时可以通过药物筛选到高效、稳定的干扰稳转细胞株。shRNAx2.0试剂盒是除了病毒法之外唯一可以轻松获得稳定干扰的稳转细胞株的实验方案。

使用HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)构建干扰稳转株的周期仅1~2周，便可以拿到长期稳定干扰的细胞株，是大幅提升实验速度的方案。

| 应用流程

HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)操作步骤(脂质体转染法)：

本试剂盒可以采用的转染试剂是Lipofectamine® 2000 Reagent (cat#11668-030)，具体参照转染试剂每种细胞情况。不同类型的转染试剂，请按照制造商的操作说明进行转染。

注意：悬浮细胞不推荐使用脂质体转染法。

HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)操作步骤(电转化法)：

本试剂盒可以Neon转染系统，具体参照设备对每种细胞参数。不同类型的电转设备，请按照制造商的操作说明进行优化。

注意：悬浮细胞推荐使用电转化法。

HyCyte™基因干扰稳转试剂盒 (shRNAx2.0)配有GFP对照shRNA载体，可以按照实际使用的方法和细胞情况，进行实验摸索，建议48小时后的目的细胞的GFP的阳性率不低于50%， shRNAx2.0试剂盒才能获得最佳效果。