HYQSaf-GelGreen 核酸染料
产品名称: HYQSaf-GelGreen 核酸染料
英文名称: Saf-GelGreen
产品编号: LS02
产品价格: 0
产品产地: 美国
品牌商标: HYQ
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使用范围: null
苏州中生达麦迪分子诊断技术有限公司
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1. 胶染法(用法同EB) a. 制胶时加入Saf-GelGreen核酸染料(如:每50 mL琼脂糖溶液中加入5 μL Saf-GelGreen 10,000×储液,以此比例类推) b. 按照常规方法进行电泳。 注意事项: a. 此方法染色染料用量相对较少。500 μL染料大约可以做100块50 mL的胶。 b. 由于Saf-GelGreen具有良好的热稳定性,可在热的琼脂糖溶液中直接添加,而不需等待溶液冷却。摇晃、振荡或者翻转以保证染料充分混匀。也可以选择将Saf-GelGreen储液加到琼脂糖粉末和电泳缓冲液中,然后用微波炉或其他常用方式加热以制备琼脂糖凝胶。DuRed兼容所有常用的电泳缓冲溶液。 c. 如果总是看到条带弥散或分离不理想,建议使用泡染法染色以确认问题是否与染料有关。如果染色后问题依旧存在,则说明问题与染料无关,请尝试:降低琼脂糖浓度;选用更长的凝胶;延长凝胶时间以保证边缘清晰;改进上样技巧或选择泡染法染色。 d. 此方法不适合预制聚丙烯酰胺凝胶,对于聚丙烯酰胺凝胶请使用泡染法。 2. 泡染法 a. 按照常规方法进行电泳。 b. 用H2O将Saf-GelGreen 10,000×储液稀释约3,300倍到0.1M NaCl中,制成3×染色液。(例如将15 μL Saf-GelGreen 10,000×储液和5 mL 1M NaCl加到45 mL H2O中)。 c. 将凝胶小心地放入合适的容器中,如聚丙烯容器中。缓慢加入足量的3×染色液浸没凝胶。室温振荡染色30 min左右,最佳染色时间根据凝胶厚度以及琼脂糖浓度不同而略有不同。对于含3.5~10%丙烯酰胺的凝胶,染色时间通常介于30 min到1 h,并随丙烯酰胺含量增加而延长。 注意事项: a. 用泡染法染色时,染料用量较多。单次使用的染色液可重复使用3次左右。 b. 3×Saf-GelGreen染色液可以大量制备,在室温下避光保存直至用完。 □ 无毒性: Saf-GelGreen独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于EB。 □ 灵敏度高: 适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。 □ 稳定性高: 适用于微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。 □ 信噪比高: 样品荧光信号强,背景信号低。 □ 操作简单: 与EB类似,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30分钟且无需脱色或冲洗,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。 □ 适用范围广: 可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于ds DNA、ss DNA或RNA染色。 □ 与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置: 标准的EB滤光片或SYBR滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在488 nm紫外光附近可得到最佳激发。对于此类装置,我们使用Saf-GelGreen,它和SYBR Green I的光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。