兽医全系列ELISA抗体检测试剂盒,包括猪细小病毒、猪蓝耳病、猪乙型脑炎、伪狂犬、猪瘟等抗体检测试剂盒,系采用国际标准的酶联免疫反应实验技术检测样本血清中常见畜、禽病抗体的方法。整个试验灵敏度高,特异性强,重复性好,操作方便快速,可分多次使用。
操作方法
- 样本稀释:用样本稀释液 (5号液)将待检血清按1:41稀释,如取5ul血清与200ul样本稀释液,充分混匀;阴、阳对照不用稀释,直接加样。
- 加样反应:取出所需反应板条,样本检测孔每孔分别加已稀释样本血清 100ul。同时设阴性、阳性及空白对照各1孔,取阴性、阳性对照各100ul分别加入反应孔内,空白对照孔仅加入100ul样本稀释液(5号液)。37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,每孔加洗涤液(2号液)1滴,立即用蒸馏水注满,静置30秒后甩去,再直接用蒸馏水洗涤四次,每次均静置30秒后甩去,最后一次甩去拍干。
- 加酶反应:除空白对照孔外其余每孔加酶结合物 (1号液)2滴,37℃避光反应30分钟后甩去孔内液体,如 上洗涤,拍干。
- 显色反应:加底物 (3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃下避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,混匀,终止反应(加终止液后蓝色会变为黄色)。
结果判定
- 肉眼观察:阴性对照接近无色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。待检孔接近无色表示该标本为阴性,待检孔呈明显黄色表示该标本为阳性。
- 仪器判断: 以空白对照调零用酶标仪于 450nm(620nm作参比波长)读取O.D值,待检孔O.D值大于阴性2.1倍者为阳性。当阴性对照O.D值低于0.05时按0.05计算。
注意事项
- 试剂盒在 2-8℃下保存,每次取出时先平衡至室温后使用。滴瓶每次用后一定要将盖拧紧,各瓶盖之间切不可混用。各试剂盒之间不可混用。
- 洗涤时将蒸馏水加满各孔,每次停放三十秒钟后甩去孔内液体。禁用自来水等其它水源。
- 为提高试验的可比性建议使用仪器判读结果,并对阴性对照测复孔以减少误差。
产品特点
- 敏感: 阳性检出率达到98%;
- 特异: 特异性99%;
- 定量: 仪器读取OD值,可对抗体水平进行定量;
- 用途: 适合于各级防检部门、猪场、兽医站广泛使用。